靶标信息
Ki-67抗体靶蛋白:Ki‑67(MKI‑67)
功能:增殖相关核蛋白;G0 静息期不表达,G1‑S‑G2‑M 增殖周期表达;细胞增殖指数标记物。
分子量:~320‑360 kDa(高分子量,条带易弥散)
抗体基本参数
来源:兔单克隆 / 小鼠单克隆 / 兔多克隆
亚型:IgG
免疫原:Ki‑67 蛋白多肽片段
种属反应性:人、小鼠、大鼠
纯化:抗原亲和纯化
缓冲液:PBS,含稳定剂,部分含叠氮钠
储存:‑20℃保存;分装,严禁反复冻融;添加 50% 甘油‑20℃长期保存。
推荐实验稀释
| 实验方法 | 稀释范围 |
| WB | 1:500‑1:1500 |
| ICC‑IF | 1:100‑1:500 |
| IHC‑P 石蜡 | 1:100‑1:400 |
| IHC‑F 冰冻 | 1:200‑1:600 |
| IP | 较少适用 |
实验要点
1. WB:高分子量蛋白,选用高浓度分离胶,转膜时间适当延长;条带较宽、弥散为正常现象。
2. IF & IHC:细胞核定位;增殖细胞核染色,静止细胞无信号;用于统计增殖阳性率。
3. IHC 石蜡切片必须充分抗原修复;灭活内源性过氧化物酶。
4. 对照:增殖活跃肿瘤组织为阳性对照;静止 / 分化组织为阴性对照。
注意事项
1. 仅用于科研,不可临床诊断。
2. Ki‑67 蛋白分子极大,样本降解极易丢失信号,样本处理需及时。
3. 不同组织最佳工作浓度需要梯度摸索。
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