产品简介
人血管内皮生长因子 酶联免疫试剂盒双抗体夹心酶联免疫检测试剂盒,用于体外定量检测人血清、血浆、细胞上清、组织匀浆中人血管内皮生长因子(VEGF)蛋白含量。仅供科研实验,不可用于临床诊断。
试剂盒组分
1. 抗人 VEGF 预包被 96 孔板
2. 人 VEGF 冻干标准品
3. 标准品稀释液
4. 生物素标记抗人 VEGF 检测抗体
5. HRP‑链霉亲和素结合液
6. 样本稀释液
7. 20× 浓缩洗涤液
8. TMB 显色底物液
9. 终止液
10. 封板膜
技术参数
1. 原理:双抗体夹心 ELISA
2. 检测样本:人血清、血浆、细胞上清液、组织匀浆上清
3. 检测范围:20‑2000 pg/mL
4. 灵敏度:≤10 pg/mL
5. 板内变异 CV<8%,板间变异 CV<10%
6. 特异性:与 VEGF 家族其它同源蛋白交叉反应低
储存条件
1. 试剂盒整体 2‑8℃避光保存,不能冷冻。
2. 未用完板条密封干燥剂一起放回 2‑8℃。
3. 复溶后标准品分装‑20℃保存,避免反复冻融。
4. 未开封有效期 6 个月。
操作简要步骤
1. 试剂全部平衡至室温;浓缩洗涤液稀释为 1× 洗涤液。
2. 标准品复溶,进行系列倍比稀释,设置标准孔及空白孔。
3. 每孔加入标准品或待测样本 100 μL,封板,室温孵育 90 min。
4. 弃液洗板 3‑5 次;加入生物素标记检测抗体,孵育 60 min。
5. 洗板,加入 HRP‑链霉亲和素,孵育 30 min。
6. 充分洗板 5 次,加入 TMB 底物,避光显色 10‑20 min。
7. 加入终止液终止显色;酶标仪 450nm 测定吸光度,标准曲线换算样本 VEGF 浓度。
样本处理
1. 血清样本避免溶血,溶血样本会升高背景干扰结果。
2. 血浆建议 EDTA 抗凝;肝素会干扰部分检测体系。
3. 细胞上清去除细胞碎片,‑20℃分装,减少冻融次数。
4. 组织匀浆充分离心,取澄清上清检测。
注意事项
1. 终止液为酸性腐蚀性液体,做好防护。
2. 浓缩洗涤液低温出现盐结晶,温水溶解再稀释使用。
3. TMB 底物应避光,若提前变蓝应丢弃。
4. 不同批次试剂盒试剂不可互换。
5. 孵育温度、时间统一;洗板不充分会造成高背景。
6. 本产品仅用于体外科研,严禁临床诊断使用。
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关键字: 人血管内皮生长因子 ;酶联免疫试剂盒;
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