HCK抗体是一种小鼠单克隆Hck抗体,它能够通过WB、IP、IF和ELISA方法检测小鼠、大鼠和人类的HCK蛋白。该抗体一般以非偶联的抗HCK抗体形式存在,同时也有多种偶联形式的抗HCK抗体,包括琼脂糖、HRP、PE、FITC和多种Alexa Fluor偶联物。该试剂在人造血细胞激酶相关的生物化学基础研究领域中有较好的应用。

图1 HCk抗体对HL-60(A和U-937(B)全细胞裂解物中HCK表达进行的蛋白质免疫印迹分析图
概述
人造血细胞激酶(The human hemopoietic cell kinase, HCK)基因定位于染色体20q11.21,编码505个氨基酸蛋白质。HCK抗体是小鼠单克隆IgG1(kappa轻链),免疫human物种的Hck的氨基酸1-85。人类造血细胞激酶(Hck)基因定位于染色体20q11-q12,编码一个由505个氨基酸组成的蛋白质。Hck蛋白在造血细胞中表达,且在粒细胞中尤为丰富,因此HCK抗体与人造血细胞的生理活性有重要的生理联系。由于HCK是Src激酶家族成员,且该家族已知通过作用于PI3K和/或MAPK通路调控肿瘤发生,有研究人员检测了HCK在PI3K和ERK通路中的作用,并在白血病细胞系中建立了HCK敲低模型。[1]
生物研究
由于HCK是Src激酶家族成员,Src是Rous肉瘤病毒(也称为禽肉瘤病毒或ASV)的v-src基因的人类同源体。Src是人类中发现的第一个原癌基因非受体酪氨酸激酶,由于具有共同的结构基序,Src家族在脊椎动物中由九个成员组成,包括Src、Yes、Fgr、Frk、Fyn、Lyn、Hck、Lck和Blk。HCK抗体可用于标记人肝细胞癌细胞:研究人员对4%多聚甲醛固定、0.1% Triton X-100透化的HepG2(人肝细胞癌细胞系)进行免疫荧光分析:使用按1:25稀释的HCK抗体进行标记,随后按1:200稀释的Dylight488标记山羊抗小鼠IgG二抗(绿色)进行检测。免疫荧光图像显示HCK抗体标记的HepG2细胞系中存在细胞质染色。
参考文献
[1] Fernanda Marconi Roversi, Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Molecular Basis of Disease, 2017, 1863, 450-461.