Dickkop相关蛋白1(Dickkopf Related Protein 1,DKK1)是一种分泌蛋白，功能是抑制经典的Wnt信号通路，具体为一方面可以结合Wnt受体LRP5和LRP6，并与Kremon1和Kremon2形成复合物，导致细胞膜上的LRP5和LRP6减少；另一方面可以直接结合LPR6并抑制Wnt诱导产生的Frizzled-LRP6复合物的形成，两个途径都可以起到抑制Wnt通路的作用。Wnt/β-catenin信号传导通路，是一组在细胞生长与发育过程中起基础作用的信号通路，DKK1从而在调控细胞的增殖、分化、凋亡和迁移方面等发挥重要的作用[1]。
人DICKKOPF 1(DKK1)ELISA检测试剂盒
人DICKKOPF 1(DKK1)ELISA检测试剂盒是一种酶联免疫吸附法体外测定DKK1蛋白浓度的试剂盒。DKK1作为一种可溶性蛋白广泛表达于各种组织中，包括皮肤、骨细胞、内皮组织和胎盘等。ELISA法是常用于研究DKK1水平与疾病发生发展的关系。以用人DICKKOPF 1(DKK1)ELISA检测试剂盒对肝癌病人外周血中的DKK-1蛋白含量进行测定的步骤举例[2]。ELISA试剂盒中的96孔酶标板预先包被了DKK1的固相抗体。取血清10ul加至90ul的含有0.1%Tween和1%BSA的PBS中，每个样品加复孔，50ul/孔；取2ul重组人DKK-1蛋白标准品加至400ul含有0.1%BSA的PBS中，然后作倍比稀释，设7个稀释度，每个标准品加复孔，50ul/孔，室温2小时；0.05%PBST溶液200ul洗3次，每次3分钟；取20ul生物素标记的羊抗人DKK-1抗体稀释在4980ul含0.1BSA的TBS溶液中，每孔加入50ul稀释液，室温2小时；0.05%PBST溶液200ul洗3次，每次3分钟；取链霉新和素偶联的辣根过氧化物酶0.5ul加入到5ml缓冲液中进行稀释，每孔加入50ul,室温30分钟；0.05%PBST溶液200ul洗3次，每次3分钟；每孔加入100ul OPD底物溶液显色，室温30分钟；每孔加入100ul的0.5M H2SO4终止液，将未加标准品的孔设为空白对照，酶标仪490nm处测各孔OD值；根据标准品作log-log标准曲线（浓度对数为横坐标，OD值为纵坐标），再计算出每一个血清样品中的DKK-1含量。
DKK1水平与疾病
DKK1通过抑制Wnt通路激活从而抑制肿瘤的发生，但如果DKK1甲基化后可使组织中DKK1表达下调，以致激活Wnt通路，引起肿瘤的发生，如白血病、肾细胞癌。而另外有相当一部分研究正好与之相反，如多发性骨髓瘤、黑色瘤和非小细胞肺癌肺癌中血清DKK1的水平却是明显升高的。说明DKK1在不同肿瘤中可能发挥不同的作用[1]。HARTHI等[3]人采用人DICKKOPF1(DKK1)ELISA试剂盒定量检测血浆中的DKK1浓度，并研究其升高与神经认知损伤总量（NCI）的关系，结果发现高DKK1水平与HIV阳性受试者的NCI水平正相关。
图1 采用抗逆转录病毒联合疗法（ART）的HIV阳性患者中血浆DKK1与神经认知损伤总量（NCI）相关
子痫前期（Preeclampsia,PE）是妊娠期特有并发症，开发潜在生物标记物可以协助诊断和治疗，[4]等人通过研究DKK1在母体血清中的表达情况，联合尿蛋白水平共同探讨了两者在PE中的作用。
参考文献
【1】马超, 芦永福., Dickkopf-1在消化系肿瘤中的研究现状与进展. 世界华人消化杂志, 2017, 25(29): 2615-2620.
【2】张海涛, 等., DKK-1蛋白在癌症诊断中的应用, CN101517096B
【3】Harthi L., et al., Plasma Dickkopf-related Protein1, an antagonist of Wnt pathway, is associated with HIV-associated neurocognitive impairment, AIDS. 2017, Jun 19;31(10):1379–1385.
【4】陶金晶，等., DKK1与尿蛋白在子痫前期中的研究进展，临床医学进展, 2023, 13(5), 7911-7916.