2016年7月,FDA正式批准了新药利非司特(lifitegrast)滴眼液的申请,该药通过拮抗ICAM-1和LFA-1的结合起效,治疗干眼病疗效明显，不良反应发生率低且症状轻微。利非司特公开的工艺路线详见WO2009139817A2、WO2011050175A1和WO2014018748A1。从现有公开的利非司特合成路线来看，5,7-二氯-2-BOC-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-羧酸是合成利非司特的关键中间体。
制备方法
方法一：
向1,2,3,4-四氢-6-羟基-异喹啉的乙腈溶液中加入对甲苯磺酸和N-氯代琥珀酰亚胺。将悬浮液冷却至室温,通过过滤分离产物,产率为约61%,纯度大于95%。将分离的TsOH盐重结晶直到纯度大于99.7%。向悬浮在甲醇中的1当量TsOH盐中加入2M碳酸钠(0.55当量)和1.2当量的Boc酸酐。该悬浮液在室温搅拌过夜。反应用HPLC监测。完成后,将混合物冷却至10℃以下,加入水,过滤分离Boc-保护的二氯化合物。将产物洗涤并在40℃干燥,其产率为95%,纯度>97%。将Boc-保护的二氯化合物混悬于二氯甲烷(10体积)中,加入吡啶(5体积)。将混合物冷却至2℃以下,并加入三氟甲磺酸酐(1.25当量)。将混合物在0-2℃搅拌10分钟，然后倾入到10体积的6%碳酸氢钠水溶液中。用二氯甲烷洗涤后,合并有机相并用硫酸镁干燥。纯化后,以90%产率和>98%的纯度得到产物(化合物4’)。将化合物4’在室温溶解在二甲基甲酰胺和甲醇中。加入二异丙基胺(4当量)。在CO气氛下,加入1,3-二(二苯基膦基)丙烷(0.1当量)和乙酸钯(0.1当量)。将反应物加热至回流,并通过HPLC监测。在接近完成时,将混合物冷却至室温。用水、乙酸乙酯和盐水后处理得到化合物4”,它可以直接使用而不需要进一步纯化。将化合物4”溶解于甲醇和2.4M氢氧化钠(各10体积)中并回流。将混合物冷却至室温,并加入甲苯。在水性处理后,将pH用 3M盐酸调至2.3,过滤分离粗产物5,7-二氯-2-BOC-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-羧酸,收率为53%,和纯度大于80%[1]。
方法二：
(1)5,7-二氯-2-叔丁氧羰基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-甲酸苄酯的合成
在5L反应釜中,机械搅拌下,依次加入1.20kg四氢呋喃,5,7-二氯-2-叔丁氧羰基-1,2,3,4-四氢异喹啉200g和N,N,N,N-四甲基乙二胺100g,向反应釜通入氮气15min排尽空气。将反应釜体系降温至-75~-78℃。滴加2.5M正丁基锂溶液300ml并控制滴加速度保持内温-70C~-78℃。滴加完毕，保持-70℃~-78℃反应1h。滴加120g氯甲酸苄酯,控制通入速度保持内温不超过-70℃,以HPLC方法进行反应监控,反应完全后,向反应体系加饱和氯化铵水粹灭反应,以乙酸乙酯萃取,水洗涤,减压浓缩得到淡黄色油状物,加入正己烷，过滤，得到粗品。粗品以乙酸乙酯打浆,过滤,抽干,干燥，得到类白色固体5,7-二氯-2-叔丁氧羰基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-甲酸苄酯182g,纯度99.1%,收率74%。
(2)5,7-二氯-2-BOC-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-羧酸的合成
室温下,将5,7-二氯-2-叔丁氧羰基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-甲酸苄酯182g加入100g甲醇,300g 10%的氢氧化钠溶液,持续搅拌过夜,向反应滴加20%柠檬酸溶液至pH=3,加入乙酸乙酯萃取,有机相减压浓缩得5,7-二氯-2-BOC-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-羧酸白色物体135g,纯度99.3%,收率94%[2]。
参考文献
[1] 原生质生物科学股份有限公司. LFA-1抑制剂及其多晶型物:CN201380048592.8[P]. 2015-07-22.
[2] 成都惟邦药业有限公司. 一种利非司特中间体的合成方法:CN201711158961.5[P]. 2018-03-30.