研究背景
泛素蛋白(Ub:ubiquitin)是真核细胞中高度保守又极其重要的一类信号蛋白，它通过与下游靶蛋白的相互作用调控多种细胞信号通路。与Ub相互作用的靶蛋白非常多，在细胞内分布极其广泛，几乎参与了所有的生命活动过程。多个Ub之间可以以异肽键共价连接，形成二聚或多聚Ub。Ub之间可以有8种不同的连接方式，以不同方式连接的多聚Ub调控不同的信号通路，参与DNA修复、基因转录调控及信号转导等不同的生命过程[1-2]。
检测机理
同人泛素蛋白(Ub)酶联免疫分析类似，小鼠泛素蛋白(Ub)Elisa试剂盒同样采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA），用纯化小鼠泛素蛋白(Ub)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入泛素蛋白(Ub)，再与HRP标记的泛素蛋白(Ub)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的泛素蛋白(Ub)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线即可计算样品中泛素蛋白(Ub)浓度[3]。
应用与研究
人体组织细胞中存在多种蛋白降解途径，目前研究最多的是溶酶体降解途径和泛素-蛋白酶体降解途径，其中溶酶体途径主要降解细胞内吞的胞外蛋白质，泛素化降解途径主要降解胞内泛素标记的蛋白质。泛素蛋白降解系统是细胞内一系列生命进程的重要调节方式，与疾病的发生发展关系密切，通过对特殊蛋白质的降解在真核细胞的分化、增殖、凋亡、基因转录、信号转导、新陈代谢调节、免疫监视等生命活动中起至关重要的作用。泛素蛋白酶体系统与疾病的关系密切，包括: 癌症、病毒感染、神经变性疾病、代谢性疾病及炎症等，未来的研究应致力于明确泛素-蛋白酶体超家族成员的功能及其相应的底物蛋白，因此可以高效检测泛素蛋白的小鼠泛素蛋白(Ub)Elisa试剂盒等的研究生产对于生物医药领域具有重要意义，为新型抗癌药物研究打下重要基础[4]。
参考文献
[1]黄新敏,张艳霞,万小荣.泛素蛋白的研究进展[J].广东农业科学, 2010, 37(6):5.DOI:10.3969/j.issn.1004-874X.2010.06.079.
[2]刘主,龚洲,唐淳.泛素蛋白及其多聚体动态结构和功能的研究[J].中国科学基金, 2015, 29(6):4.DOI:CNKI:SUN:ZKJJ.0.2015-06-016.
[3]佚名.人泛素蛋白(Ub)酶联免疫分析[J].
[4]王青元.泛素蛋白酶体系统组成及其在疾病中的作用[J].中国妇幼保健, 2011, 26(30):3.DOI:CNKI:SUN:ZFYB.0.2011-30-059.