介绍
芴甲氧羰基-(3-甲基戊基酯)-天冬氨酸（Fmoc-Asp(O3MePent)-OH）是一种用于Fmoc固相多肽合成的关键保护型天冬氨酸衍生物，在天冬氨酸的N端引入芴甲氧羰基（Fmoc）保护氨基，同时将侧链羧基修饰为3-甲基戊基酯（O3MePent），能有效规避多肽合成过程中氨基与羧基发生副反应、手性消旋等问题，且Fmoc可通过碱解选择性脱除。
图一 芴甲氧羰基-(3-甲基戊基酯)-天冬氨酸
合成
在25°C下，在装有温度计的5L反应器中，加入2.5L四氢呋喃、1L水、250g 3-甲基-3-戊醇-磷酸-1-苄酯、25g钯碳（钯负载量为5wt%），在0.5MPa氢气压力下，过滤后在25°C下搅拌14h，滤液浓缩除去四氢呋喃，加入1L乙酸乙酯萃取水相两次，合并有机相，用饱和氯化钠洗涤1次，干燥并用无水硫酸钠浓缩，用乙酸乙酯石油醚重结晶得到200g 芴甲氧羰基-(3-甲基戊基酯)-天冬氨酸[1]。
图二 芴甲氧羰基-(3-甲基戊基酯)-天冬氨酸的合成
在干燥氩气氛围下，将S-三苯甲基高半胱氨酸（S-Trt-hCys，1.0当量）置于干燥反应烧瓶中，加入无水二氯甲烷（按每毫摩尔底物加 5-10 mL的比例），室温搅拌至底物完全溶解；随后加入1.1-1.2当量的N,N-二异丙基乙胺（DIPEA）作为缚酸剂，搅拌10-15分钟混匀；接着缓慢加入溶于少量无水二氯甲烷的1.1-1.2当量N-(9H-芴-2-基甲氧基羰氧基) 琥珀酰亚胺（Fmoc-OSu）溶液，室温持续搅拌 2-4小时，通过薄层色谱（展开剂为二氯甲烷：甲醇=15:1，254 nm 紫外显色）监测至S-Trt-hCys原料斑点消失；反应完成后，将反应液转入分液漏斗，依次用饱和氯化铵水溶液（洗2次）、饱和氯化钠水溶液（洗1次）洗涤有机相，有机相经无水硫酸钠干燥15分钟后过滤，滤液减压浓缩至近干，粗产物经硅胶柱层析（洗脱剂梯度为石油醚：乙酸乙酯=3:1至 1:1）纯化，收集目标组分并浓缩，最终得到白色固体状的芴甲氧羰基-(3-甲基戊基酯)-天冬氨酸[2]。
图三 芴甲氧羰基-(3-甲基戊基酯)-天冬氨酸的合成2
参考文献
[1]Current Patent Assignee: SHANGHAI GLORILADO BIOTECHNOLOGY LTD RESPONSIBILITY - CN114478324, 2023, B
[2]Karlström A, Undén A. A New Protecting Group For Aspartic Acid That Minimizes Piperidine-Catalyzed Aspartimide Formation In Fmoc Solid Phase Peptide Synthesis[J]. Tetrahedron Letters, 1996, 37(24): 4243-4246.