介绍
FMOC-11-氨基-3,6,9-三氧杂十一酸的分子式为C₂₃H₂₇NO₇，分子一端为芴甲氧羰基（Fmoc）保护的伯氨基，另一端为游离羧基，中间由含三个醚键的柔性聚乙二醇链连接，兼具Fmoc基团的特征紫外吸收（甲醇中于269 nm、272 nm处有最大吸收）与乙二醇链的亲水性，可完美适配Fmoc策略的固相多肽合成体系，通过羧基与多肽氨基偶联、脱除Fmoc后暴露氨基以继续肽链延伸或功能修饰，中间的柔性醚链能显著提升偶联产物的水溶性与生物相容性。
图一 FMOC-11-氨基-3,6,9-三氧杂十一酸
合成
向200 mL反应瓶中加入5.0 g BP103a（1.0当量）、50 mL水与3.5 g碳酸氢钠（2.0当量），搅拌混匀。将7.3 g芴甲氧羰基-羟基琥珀酰亚胺（Fmoc-HOSU，1.0当量）溶于50 mL乙二醇二甲醚（DME）中，逐滴加入上述反应体系，补加50 mL四氢呋喃（THF），搅拌反应过夜。经薄层色谱（TLC）监测反应完全后，蒸除有机溶剂，用稀盐酸调节体系pH至2，乙酸乙酯萃取；有机相依次经水、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后得到7.6 g化合物FMOC-11-氨基-3,6,9-三氧杂十一酸，产物为类白色固体。
图二 FMOC-11-氨基-3,6,9-三氧杂十一酸的合成
该反应为水相中的氨基Fmoc保护反应，以2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙酸盐酸盐与N-(9H-芴-9-基甲氧基羰氧基)琥珀酰亚胺为原料，通过碱介导的酰化反应制备FMOC-11-氨基-3,6,9-三氧杂十一酸。具体操作如下：将2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙酸盐酸盐分散于纯水中，加入碳酸钾作为缚酸剂中和盐酸并游离出伯氨基，室温搅拌15分钟使体系充分脱质子；随后在30分钟内分批加入Fmoc-琥珀酰亚胺酯，加毕后室温下持续搅拌反应16小时以完成氨基的酰化。反应结束后，用2 mol/L氢氧化钠水溶液将体系pH调节至9，用二氯甲烷多次洗涤以除去未反应完全的Fmoc试剂、副产物羟基琥珀酰亚胺等脂溶性杂质；水相在搅拌下缓慢滴加浓盐酸酸化至pH 2，使末端羧基质子化后用二氯甲烷多次萃取收集有机相；合并的有机相经无水硫酸镁干燥、过滤后减压浓缩除去溶剂，所得粗产物经快速硅胶柱层析纯化，采用二氯甲烷逐步过渡到二氯甲烷-甲醇（95:5至9:1）的梯度洗脱体系分离，最终得到纯品FMOC-11-氨基-3,6,9-三氧杂十一酸，产物为白色固体[2]。
图三 FMOC-11-氨基-3,6,9-三氧杂十一酸的合成2
参考文献
[1]Current Patent Assignee: BRIGHTGENE BIO MEDICAL TECHNOLOGY - EP3321279, 2018, A1
[2]Schmidt F ,Rosnizeck C I ,Spoerner M , et al.Zinc(II)cyclen–peptide conjugates interacting with the weak effector binding state of Ras[J].Inorganica Chimica Acta,2010,365(1):38-48.DOI:10.1016/j.ica.2010.07.067.