背景技术
S-三苯甲基-L-半胱氨酸分子式为C22H21NO2S,是一种化工中间体，常用于多肽合成。其用干多肱合成过程中是，原料的纯度对多肽合成的成功与否或产品收率由重要影响。然而传统工艺生产的S-三苯甲基-L-半胱氨酸存在纯度不够的缺陷。例如：传统工艺中，在调节溶液pH进行结品时，采用碳酸钠作为碱液，所以产品结品时，碳酸钠同时结品，引起S-三苯甲基-L-半胱氨酸产品含有大量盐分而不纯。而且由于碳酸钠溶液较强，在多肽合成过程中，导致产品性质不稳定，会产生分解。
制备方法
步骤一：分别取L-半胱氨酸盐酸盐、三苯基氯甲烷和三苯基氯甲烷，将L-半胱氨酸盐酸盐和三苯基氯甲烷加入N,N-二甲基甲酰胺中，L-半胱氨酸盐酸盐、三苯基氯甲烷、N,N-二甲基甲酰胺之间的质量比为1:0.8-1:2-4。随后在20-30℃条件下反应18-30h得到反应液。
步骤二：向反应液中加入冷水进行降温至20℃下,然后用氨水调节pH至弱酸性至6-7进行结晶,取晶体得到粗品。
步骤三：取粗品，先用纯水洗涤，然后溶解于乙醚中，形成质量分数为30-40%的溶液，完全溶解后，过滤取滤液。
步骤四：冷却滤液至20℃以下进行结品,当开始出现晶膜时,向其中加入S-三苯甲基-L-半胱氨酸晶种，晶种与粗品的质量之比为1:50-80，完全结晶后取晶体，再经干燥即得S-三苯甲基-L-半胱氨酸纯品[1]。
作用研究
为研究驱动蛋白Eg5在神经母细胞瘤中表达及其靶向抑制剂S-三苯甲基-L-半胱氨酸(S-Trityl-L-Cysteine,STLC)对神经母细胞瘤的诱导作用。吴伟等人通过免疫荧光及Western-blot检测Eg5蛋白在神经母细胞瘤中的表达水平,通过相差显微镜观察S-三苯甲基-L-半胱氨酸对细胞形态学的影响,采用CCK-8法、流式细胞术检测S-三苯甲基-L-半胱氨酸对细胞增值、凋亡及周期的影响,采用FISH法检测STLC对原癌基因MYCN扩增的影响,并经DAPI细胞核染色实验观察STLC对细胞核形态变化的影响。结果，免疫荧光及Western-blot结果显示Eg5蛋白在神经母细胞瘤中稳定表达。细胞形态学观察结果表明,细胞经不同浓度的S-三苯甲基-L-半胱氨酸诱导,当浓度≥5μmol/L,诱导时间为72h时,细胞形态变圆,出现大量凋亡样小体。CCK-8细胞增殖能力检测及流式细胞术分析结果显示,S-三苯甲基-L-半胱氨酸具有促进细胞凋亡,抑制细胞分裂与增殖的作用,将细胞周期阻滞在G2/M期,且其诱导作用呈时间剂量依赖性。FISH实验证实S-三苯甲基-L-半胱氨酸对MYCN基因扩增无影响。结论，神经母细胞瘤组织及细胞株中均表达Eg5蛋白,S-三苯甲基-L-半胱氨酸通过抑制Eg5,影响神经母细胞瘤细胞的分裂及增值,从而促进细胞凋亡。结果表明Eg5有望作为神经母细胞瘤分子治疗的靶点[2]。
参考文献
[1] 成都市科隆化学品有限公司. 一种S-（三苯甲基）-L-半胱氨酸的制备方法:CN201811071162.9[P]. 2019-01-04.
[2] 吴伟,邵静波,郑露露,等. Eg5蛋白靶向抑制剂S-Trityl-L-Cysteine对神经母细胞瘤增殖和分裂的影响[J]. 中华小儿外科杂志,2016,37(6):464-470. DOI:10.3760/cma.j.issn.0253-3006.2016.06.000.