WDR5抗体面对的靶点WD重复域蛋白5(WDR5),具有典型的WD重复序列,能与组蛋白H3第4位赖氨酸(H3K4)甲基化位点结合,是染色体H3修饰蛋白复合体TrxG的核心组分,参与细胞周期进展与基因调控等过程。胃癌、结直肠癌中其表达升高可通过H3K4三甲基化促进细胞周期素D1表达,膀胱癌与宫颈癌中也有类似报道。WDR5抗体是用于识别和结合WD重复序列蛋白5(WDR5) 的科研试剂,在表观遗传学、染色质重塑和基因转录调控研究中应用广泛。
将非肌层浸润膀胱癌(NMIBC)与正常膀胱黏膜组织各94例份,测得WDR5 mRNA相对表达量为1.62±0.41,正常黏膜为0.61±0.12。以免疫组化读出WDR5蛋白阳性率71.28%,正常黏膜仅10.64%[1]。所用WDR5抗体为Abcam兔单克隆抗体,判读以“染色深度×染色面积”的乘积衡量,≥2分判为阳性。WDR5 mRNA高表达者3年无进展生存率41.67%,低表达者78.26%,多因素Cox回归显示其为独立危险因素(HR=1.744),并与BLACAT2 mRNA呈正相关[1]。
以两条shRNA(shWdr5 A、shWdr5 B)慢病毒感染肝癌细胞系Huh7与HepG2,先以定量PCR确认Wdr5下调,再以WDR5抗体通过免疫印迹复核敲低效果,Wdr5条带减弱而同膜Gapdh内参稳定。MTT与克隆形成实验显示增殖能力同步受抑,Wnt通路分子APC与β-catenin在mRNA与蛋白两个层面均下调[2]。
将宫颈癌78例、宫颈上皮内瘤变(CIN)78例与健康对照78名分组,血清WDR5 mRNA相对表达量依次为1.61±0.43、1.29±0.21与1.00±0.29,血清WDR5蛋白依次为36.62±4.29、32.98±3.95与18.34±2.18 pg/mL。组织一侧采用鼠抗人WDR5抗体(1:200稀释)与生物素标记二抗(1:300稀释),5%山羊血清室温封闭10 min、一抗室温孵育30 min,“染色深度×染色面积”≥3分判为阳性,癌组织阳性率76.92%,癌旁组织11.54%[3]。WDR5 mRNA单项诊断宫颈癌的曲线下面积为0.767,与miR-455-5p联合升至0.883。高表达组3年总生存率37.50%,低表达组63.16%,多因素Cox回归HR=4.261[3]。

WDR5抗体的四项选型核对。其一是识别对象与表位:WDR5是核内WD40重复蛋白,免疫原落在WD40重复区还是复合体结合面,直接决定染色能否落在核内。其二是场景与浓度:石蜡切片1:200、室温孵育30 min可直接沿用,换到免疫印迹则需另立工作浓度,并补齐转膜、封闭与显影条件。其三是判读口径:核着色与胞质着色应分别记录、分别计分,并把阳性下限写明,避免两篇阳性率被直接并列。其四是基质与量程:组织匀浆、石蜡切片与血清不宜共用同一稀释体系,血清定量的量程须覆盖18~37 pg/mL这一较窄区间。
参考文献
[1] 石艳宏, 何丹, 马晓燕, 等. 非肌层浸润膀胱癌患者癌组织BLACAT2、WDR5表达观察及预后影响因素分析[J]. 山东医药, 2023, 63(24): 7-11.
[2] 王晓锋, 王玉平, 魏文珍, 等. Wdr5通过Wnt通路促进肝癌细胞增殖[J]. 胃肠病学和肝病学杂志, 2016, 25(11): 1262-1266.
[3] 刘昊, 付淼, 刘蓬, 等. WDR5和miR-455-5p表达在宫颈癌诊断和预后评估中的价值[J]. 检验医学, 2025, 40(9): 867-874.