刺梨苷（Kaji-ichigosideF1）是刺梨 Rosa roxburghii（蔷薇科）果实，是刺梨标志性主活性成分，白色至类白色粉末；溶于甲醇、乙醇、DMSO，难溶于水。在体外对内皮细胞、心肌细胞缺氧损伤具有显著预防作用，但该化合物在高原缺氧环境下是否对骨组织损伤也具有预防作用尚未进行过研究。本文拟采用大鼠急性高原缺氧损伤模型，观察刺梨苷对急性高原低氧环境下骨组织损伤的预防作用，为抗高原缺氧药物的研究提供参考[1]。
实验方法
1、实验分组：50只雄性的Sprague-Dawley大鼠，体重（200±20）g，随机分为高原缺氧模型组（M）、常氧对照组（C）、刺梨苷高剂量（15mg/kg）干预组（KH）、刺梨苷低剂量（5mg/kg）干预组（KL）与红景天苷（15mg/kg）干预组（S）。
2、急性高原低氧模型的建立：采用数控低压氧舱建立大鼠高原低氧模型。设置舱内温度为（20±2）℃，湿度为（30±5）%。上升至7500m模拟海拔高度所需时间为15min。舱内压力达到指定的海拔后，持续低压缺氧18h。缺氧处理结束后，使舱内压力回升至舱外气压，所需时间为15min。
3、采取分光光度法检测大鼠血浆超氧化物歧化酶（SOD）、乳酸脱氢酶（LDH）、碱性磷酸酶（ALP）、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）活性及丙二醛（MDA）、钙（Ca）、磷（P）的含量。
4、免疫组织化学染色法，观察大鼠股骨组织中sclerostin、β-catenin、OPG及RANKL蛋白表达情况。
5、采用Western Blotting方法，检测大鼠股骨组织中sclerostin、β-catenin、Runx2、OPG及RANKL蛋白表达水平。
结果
1、血浆氧化应激指标检测结果：与常氧对照组相比，缺氧模型组大鼠血浆SOD活性明显降低，MDA和LDH水平明显升高，SOD/MDA比值明显减小；与缺氧模型组相比，刺梨苷高、低剂量组大鼠血浆SOD活性明显增强，MDA和LDH水平都明显降低。
2、血浆骨代谢指标检测显示：相比于常氧对照组，缺氧模型组的大鼠血浆ALP水平明显降低，TRAP水平和磷含量明显提高，钙离子含量未出现明显变化；相比于缺氧模型组，刺梨苷低剂量组大鼠血浆ALP水平明显增强，TRAP水平明显降低，刺梨苷高、低剂量组大鼠血浆磷含量均明显降低，钙离子含量则无显著变化。
3、骨组织切片免疫组化染色结果：相比较于常氧对照组，缺氧模型组sclerostin和RANKL表达增强，β-catenin和OPG表达减弱；与缺氧模型组比较，刺梨苷高、低剂量组sclerostin和RANKL表达降低，β-catenin和OPG表达升高。
4、骨组织蛋白Western Blotting检测结果：相比于常氧对照组，缺氧模型组sclerostin和RANKL表达升高，β-catenin和OPG表达减弱，OPG/RANKL比率减小，Runx2表达降低；相比于缺氧模型组，刺梨苷高、低剂量组sclerostin和RANKL表达降低，β-catenin表达升高，OPG/RANKL比率增大，Runx2表达升高。
结论
1、刺梨苷干预可显著提高急性高原缺氧大鼠血浆SOD活性，减少MDA生成，降低LDH水平，显著提高SOD/MDA比值，表明刺梨苷可减轻急性高原缺氧诱导的大鼠氧化应激损伤。
2、刺梨苷干预可显著降低大鼠血浆TRAP水平，升高ALP水平，表明刺梨苷可减轻急性高原缺氧导致的大鼠骨组织损伤。
3、刺梨苷可以显著升高大鼠骨组织OPG、β-catenin和Runx2表达，降低RANKL和sclerostin表达，提高OPG/RANKL比率。提示刺梨苷预防大鼠急性高原缺氧性骨组织损伤的作用与其对sclerostin及其下游的Wnt/β-catenin信号通路的影响有关[1]。
参考文献
[1]张婷婷. 刺梨苷对大鼠急性高原缺氧性骨损伤预防作用研究[D]. 石家庄:河北医科大学,2020.