碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP/ALP)活性测定试剂盒
分光光度法 50 管/24 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
AKP/ALP 是一种含锌的糖蛋白酶,在碱性环境中可水解各种天然及人工合成的磷脂单酯化合物。 AKP/ALP 广泛分布于人体各脏器中,以肝脏为主。
测定原理:
在碱性环境中,AKP/ALP 催化磷酸苯二钠生成游离酚;酚与 4-氨基安替比林和铁氰化钾反应红色亚 醌衍生物,在 510nm 有特征光吸收;通过测定 510 nm 吸光度增加速率,来计算 AKP 活性。
粗酶液提取:
1. 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(ml)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1ml 试剂 一)进行冰浴匀浆,4℃、8000g 离心 10min,取上清液待测。
2. 细菌或细胞:按照细菌或细胞数量(10 4个):试剂一体积(ml)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万 细胞加入 1ml 试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min); 然后 8000g,4℃,离心 10min,取上清置于冰上待测。
3. 血液可直接测定,或者适当稀释后测定。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1ml 玻璃比色皿和蒸馏水。
伊势久(江苏连云港)生物科技有限责任公司
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