人Cathepsin Delisa试剂盒
产品简介:
人Cathepsin D ELISA试剂盒用于定量检测人体样本（如血清、血浆、细胞培养上清或组织匀浆）中的Cathepsin D蛋白水平。Cathepsin D是一种溶酶体天冬氨酸蛋白酶，在蛋白质降解、细胞信号传导及疾病（如肿瘤、神经退行性疾病）中发挥重要作用
英文名称 | Human Cathepsin D ELISA Kit | 产品类别 | Human/人Elisa试剂盒 |
货号 | A129697 | 规格 | 48T/96T |
检测原理
采用双抗体夹心法ELISA技术：
捕获抗体：微孔板预包被抗Cathepsin D抗体，特异性结合样本中的Cathepsin D；
检测抗体：加入生物素标记的抗Cathepsin D抗体，与捕获的Cathepsin D结合形成免疫复合物；
酶标记物：加入HRP标记的链霉亲和素，与生物素结合；
显色反应：加入TMB底物，酶催化显色，颜色深浅与Cathepsin D浓度正相关，通过酶标仪测定吸光度（OD值）计算浓度。
核心组件
预包被抗体板：已包被抗Cathepsin D抗体的96孔板；
标准品：不同浓度的重组人Cathepsin D，用于绘制标准曲线；
检测抗体：生物素标记的抗Cathepsin D抗体；
酶标记物：HRP标记的链霉亲和素；
底物溶液：TMB显色液；
终止液：用于终止反应，通常为硫酸溶液。
检测流程
加样：加入标准品、样本和检测抗体；
温育：促进抗原抗体反应；
洗涤：去除未结合成分；
显色：加入底物溶液，观察颜色变化；
终止：加入终止液，停止反应；
读数：酶标仪测定OD值，计算Cathepsin D浓度。
应用价值
肿瘤研究：Cathepsin D在多种癌症中高表达，参与肿瘤侵袭、转移及耐药性，检测其水平有助于研究肿瘤机制及评估预后
神经退行性疾病研究：Cathepsin D参与蛋白质降解与细胞凋亡，在阿尔茨海默病等疾病中具有研究价值
炎症与免疫研究：Cathepsin D在炎症反应中调控细胞因子释放与免疫细胞活性，检测其水平有助于研究疾病机制
组织修复与再生研究：Cathepsin D参与细胞外基质重塑，在组织损伤修复过程中发挥重要作用。
应用与服务
该试剂盒广泛应用于生物医学研究领域，如机制研究、疾病标志物检测等。部分厂家提供免费代测服务和专业技术支持，方便用户获得准确可靠的实验结果。
操作要点：
需严格遵守试剂盒说明书操作，建议做复孔及标准曲线。
洗涤过程至关重要，洗涤不充分会影响结果准确性。
所有试剂使用前需恢复至室温，避免批号混用。
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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：
稀释线性实验 (Linearity)：
操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。
预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test)：
操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。
预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。
回收实验 (Recovery Test)：
操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。
预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。
注意事项
试剂盒组分应按说明储存，使用前平衡至室温。
实验中需避免交叉污染，建议使用一次性吸头。
充分混匀对实验结果至关重要。
试剂盒仅供研究使用，不可用于临床诊断。
显色液需避光保存，终止液为2M硫酸，操作时需安全防护。
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