产品介绍:

大鼠Cathepsin D ELISA试剂盒用于定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞上清液等生物样本中组织蛋白酶D(Cathepsin D, CTSD)的含量,广泛应用于肿瘤、炎症、自身免疫疾病及神经退行性疾病等科研领域。
产品名称 | 大鼠Cathepsin Delisa试剂盒 | 英文名称 | RatCathepsin D ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A129769 |

检测原理

采用双抗体夹心ELISA法。微孔板预包被抗大鼠Cathepsin D特异性抗体,样本中的Cathepsin D与抗体结合后,加入酶标二抗,形成夹心复合物,TMB显色,450nm波长测定吸光度,Cathepsin D浓度与OD值呈正相关。
高特异性,无显著交叉反应或干扰
样本类型
血清、血浆(EDTA/肝素/柠檬酸盐)、组织匀浆(如肿瘤、肾、脑)、细胞上清等
产品特点
高灵敏度、高特异性,批内和批间变异系数均小于15%
操作简便,适合高通量筛选
仅用于科研,不得用于临床诊断
操作流程简述

标准品和样本适当稀释
加样(50-100μL/孔),37℃孵育30-60分钟
洗涤,加入酶标二抗
再次温育、洗涤,加入TMB显色液
终止反应,酶标仪450nm读数
绘制标准曲线,计算Cathepsin D浓度
保存条件
2-8℃保存,避免反复冻融,有效期约6个月
主要应用
肿瘤机制研究(如乳腺癌、前列腺癌)、炎症与自身免疫疾病、神经退行性疾病(如阿尔茨海默病)、细胞凋亡及蛋白质水解相关通路分析等。
ELISA试剂盒的主要优点缺点

维度 优势 (Pros) 劣势 (Cons)
检测性能 灵敏度极高,特异性强,结果准确 可能存在交叉反应,易受干扰物影响
操作体验 流程标准化,无需昂贵设备,适合高通量检测 步骤多且繁琐,耗时较长,对操作技巧有要求
经济成本 适合大批量样本检测,长期看性价比尚可 单次试剂成本较高,且不同批次可能存在差异
应用范围 可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本 对样本质量(如是否溶血)敏感
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试剂与样本准备阶段

温度平衡(最容易被忽视的点)
操作: 从冰箱取出的试剂盒(包括标准品、酶标试剂、样品等)必须在室温(18-25℃)下平衡 30 分钟。
后果: 冷试剂直接使用会导致孔内温差,产生冷凝水或非特异性背景,严重影响 OD 值。
试剂配制
洗涤液: 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。
现用现配: 酶标试剂和显色液(如 TMB)对光和热敏感,建议在使用前配制工作液,避免失效。
样本处理
避免溶血: 血清样本如果发生溶血(红细胞破裂),会释放过氧化物酶,导致假阳性或背景过高。
离心去杂质: 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心,去除沉淀和悬浮物,防止堵塞孔底或干扰读数。
稀释倍数: 如果样本浓度过高,超出标准曲线范围,必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。
关键字: 大鼠;Cathepsin D;ELISA试剂盒;
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