路路通探针法PCR鉴定试剂盒
商品属性
产品名称 | 路路通探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Fructus Liquidambaris Probe-based PCR Identification Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5048 |
预期用途
本试剂盒基于TaqMan探针法实时荧光定量PCR技术，用于路路通核酸的特异性检测，适用于科研领域（如物种鉴定、基因表达分析），不用于临床诊断。
技术原理
探针法qPCR：针对路路通基因保守区域设计特异性引物及探针，通过荧光信号实时监测扩增过程，实现高灵敏度（低至50拷贝/反应）和特异性检测。
防污染设计：含阳性质控品（人工合成DNA片段）和阴性质控品，避免假阴性/假阳性干扰。
试剂盒组成
| 组分 | 规格（示例） | 功能说明 |
| qPCR反应缓冲液 | 500μL/管 | 提供扩增反应环境 |
| 酶混合液 | 100μL/管 | 含Taq DNA聚合酶等 |
| 引物-探针混合液 | 150μL/管 | 特异性扩增目标序列 |
| 阳性质控品 | 50μL（1×10^7拷贝/μL）| 验证实验有效性 |
| 阴性质控品 | 50μL/管 | 监控交叉污染 |
实验步骤
样本处理
样本类型：组织、血液、细菌等（需避免DNA/RNA直接提供，建议保存于液氮或Trizol液）。
核酸提取：推荐使用商品化提取试剂盒（如Hypure病毒基因组DNA提取试剂盒）。
反应体系配制
每反应需：19.5μL反应液 + 0.5μL扩增液 + 5μL模板DNA。
设置阴性/阳性对照。
PCR扩增程序
预变性：95℃ 3min（1循环）；
扩增：95℃ 15sec → 55℃ 30sec（40循环，FAM通道采集信号）。
结果分析
阳性判定：Ct值≤35且扩增曲线呈典型S型；
阴性判定：无Ct值或Ct值＞38。
注意事项
操作规范：分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区），避免气溶胶污染。
质量控制：每批次实验需包含阴/阳性质控，若对照异常则结果无效。
样本要求：避免反复冻融，长期保存需-70℃以下。
性能参数
特异性：经40余种近缘物种验证，无交叉反应；
灵敏度：最低检测限50拷贝/反应；
重现性：批内/批间变异系数＜5%。
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