苦杏仁探针法PCR鉴定试剂盒
商品属性
产品名称 | 苦杏仁探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Semen Armeniacae Amarum Probe-based PCR Identification Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5063 |
预期用途
本试剂盒基于TaqMan探针法实时荧光PCR技术，专用于苦杏仁核酸的体外定性检测，适用于科研用途（如植物基因鉴定、食品安全检测等），不可用于临床诊断或治疗。
检验原理
采用实时荧光定量PCR技术，针对苦杏仁基因保守区域设计特异性引物及探针。探针5'端标记FAM荧光基团，3'端含淬灭基团。PCR扩增时，Taq酶的5'→3'外切酶活性切割探针，释放荧光信号，通过仪器实时监测荧光强度实现靶序列的定性与定量分析。
试剂组成
| 组分名称 | 规格/数量 |
| PCR反应液 | 19.5μL/次 × 50次 |
| 扩增预混液 | 0.5μL/次 × 50次 |
| 阳性质控品（DNA片段） | 50μL × 1管（1×10^8拷贝/μL） |
| 阴性质控品 | 50μL × 1管 |
| 说明书 | 1份 |
注：不同批号试剂不可混用，避免反复冻融（≤7次）。
储存与运输
储存条件：-20℃±5℃避光保存，有效期12个月。
运输条件：冰袋（2~8℃）运输，严禁高温或反复冻融。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪，包括：
ABI 系列（如7500、StepOnePlus）
Bio-Rad（CFX96）
Roche LightCycler
其他支持FAM通道的机型。
自备耗材：无核酸酶离心管、滤芯吸头（10/200/1000μL）、移液器等。
样本要求
样本类型：植物组织、加工食品提取物等。
处理建议：
使用商品化DNA提取试剂盒（推荐柱式法）。
提取后DNA建议-20℃短期保存，长期保存需-70℃。
避免污染：操作分区（样本处理、试剂配制、扩增区），使用独立耗材。
操作步骤
1. 试剂配制
解冻后涡旋混匀，离心10秒。
按N（样本数+阴阳性对照）计算反应体系：
每反应：19.5μL反应液 + 0.5μL扩增液。
2. 加样
各反应管加入5μL模板DNA（样本/阴阳对照）。
3. PCR扩增程序
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 | 荧光采集 |
| 预变性 | 95℃ | 3 min | 1 | 否 |
| 扩增 | 95℃ | 15 sec | 40 | 否 |
| | 55℃ | 30 sec | | 是 |
结果判读
阳性：Ct值≤35，且扩增曲线呈S型。
可疑：35<Ct<40，需重复检测。
阴性：Ct≥40或无扩增曲线。
定量分析：以标准曲线（10^2~10^7拷贝/μL梯度）计算样本浓度。
注意事项
仅限科研使用，不可用于临床。
避免试剂交叉污染，建议在超净台或PCR工作站操作。
阳性质控品为人工合成DNA片段，无生物传染风险。
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