桔梗探针法PCR鉴定试剂盒
商品属性
产品名称 | 桔梗探针法PCR鉴定试剂盒 | 英文名称 | Radix Platycodonis Probe-based PCR Identification Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR5075 |
预期用途
适用于桔梗核酸的体外定性检测，用于科研实验或辅助诊断，结果需结合其他临床数据综合分析。不适用于临床诊断或治疗。
检验原理
采用TaqMan探针法实时荧光定量PCR技术：
特异性引物设计：针对桔梗基因高度保守区域设计引物及探针。
荧光信号检测：扩增过程中释放FAM通道荧光信号，通过实时监测Ct值实现定性/定量分析。
试剂组成
| 组分 | 规格（示例） |
| 桔梗扩增液 | 25μL×1管 |
| 桔梗反应液 | 975μL×1管 |
| 阳性质控品（DNA标准品） | 50μL×1管（86 bp片段）|
| 阴性质控品 | 50μL×1管 |
| 说明书 | 1份 |
储存与运输
储存条件：-20℃±5℃避光保存，避免反复冻融（≤7次）。
有效期：12个月。
运输：低温（2~8℃）冰袋运输。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪，包括：
ABI 系列（7500/7700/7900需ROX校正）
Bio-Rad（CFX）、Roche LightCycler、Eppendorf等。
样本要求
样本类型：全血、血清、组织（如肠道）、拭子等。
保存：短期-20℃，长期-70℃（≤6个月），避免反复冻融。
DNA提取：推荐配套商品化提取试剂盒（如Hypure病毒基因组DNA提取试剂盒）。
操作步骤
DNA提取：按标准方法纯化样本DNA。
试剂配制：
反应体系（20μL）：19.5μL反应液 + 0.5μL扩增液 + 5μL模板DNA。
设置阳/阴性对照（各1管）。
PCR扩增程序：
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 3 min | 1 |
| 扩增 | 95℃ | 15 sec | 40 |
| 退火/延伸 | 55-60℃ | 30 sec | |
结果判读：
阳性：Ct值≤35；阴性：无扩增曲线或Ct值＞35。
注意事项
实验需分区操作（样本处理、试剂配制、扩增区），避免污染。
阳性质控品为合成DNA片段，不可直接接触活体病原。
不同仪器需优化循环参数，具体参考设备说明书。
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