产品概述
本试剂盒采用探针法荧光定量PCR技术,专用于山茱萸(Fructus corni)的快速、高特异性鉴定,适用于科研用途。试剂盒包含优化的引物探针组合、阳性对照及反应缓冲体系,支持定性与定量检测,灵敏度达5个数量级线性范围,可检测低至10拷贝/μL的靶标核酸。
产品名称
山茱萸探针法PCR鉴定试剂盒
英文名称
Fructus Corni Probe-based PCR Identification Kit
产品规格
50T
产品分类
荧光定量PCR
检测类型
PCR检测
产品货号
PR4984
主要成分
探针法qPCR缓冲液(500 μL)
探针法qPCR酶混合液(50 μL)
荧光PCR专用模板稀释液(1 mL)
PCR引物-探针干粉(50次反应)
阳性对照(10^7拷贝/μL,50 μL)
实验流程
1. 标准曲线制备(10倍梯度稀释)
标记6管,依次加入45 μL稀释液,从阳性对照(10^7拷贝/μL)开始梯度稀释至10^1拷贝/μL,冰上暂存。
2. 样品DNA提取
建议设置阴性对照(水)和阳性对照(试剂盒提供)。使用兼容的DNA提取试剂盒纯化样本。
3. qPCR反应(20 μL体系)
按以下程序运行:
逆转录(如适用):50℃ 10 min
预变性:95℃ 10 min
40循环扩增:95℃ 15 sec → 60℃ 60 sec(采集FAM信号)
4. 数据分析
定量检测:以标准曲线log值为横轴,Ct值为纵轴计算样本浓度。
定性检测:
阳性:Ct ≤ 39,典型扩增曲线;
阴性:Ct ≥ 40;
灰区(39<Ct<40)需复测确认。
注意事项
防污染:分区操作(样本处理、试剂配制、扩增),使用带滤芯枪头。
质量控制:阴性对照Ct≥40,阳性对照Ct≤39且呈S型曲线。
保存与运输:
试剂盒-20℃保存,有效期12个月;
样本短期-20℃保存,长期-70℃(避免反复冻融)。
局限性声明
结果可能受样本质量、提取效率、病原体变异或操作误差影响,建议结合其他检测方法验证。
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