鲑鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Salmon-derived Component Probe-based Real-time PCR Kit
规格
50T
货号
PR5296
预期用途
用于检测鲍鱼等样本中鲑鱼源性成分的DNA,适用于科研实验。
检测原理
本试剂盒基于双通道荧光定量PCR技术,通过特异性探针与引物对鲑鱼源性DNA靶序列进行扩增和定量检测。采用标准品同步扩增法,将参照基因(如管家基因RPPH1)与目的基因(如鲑鱼特异性序列)克隆至同一质粒载体(如pMD18-T),构建标准曲线,通过计算拷贝数比值实现相对定量,提高检测可靠性。
产品特点
高特异性:引物基于鲑鱼保守序列设计,无交叉反应。
高灵敏度:最低检测限达几百拷贝/反应。
操作简便:一管式反应体系,减少污染风险。
对照齐全:含阳性对照,有效区分假阴性结果。
即开即用:用户仅需提供待测样本DNA即可开展实验。
操作步骤
(一)标准品稀释(以10^2-10^7拷贝/μL梯度为例)
标记7管为1-7号,1号管加90μL稀释液,其余各加45μL。
取10μL阳性对照(10^8拷贝/μL)加入1号管,混匀后依次10倍稀释至6号管(7号管为阴性对照)。
稀释需在独立区域进行,使用无菌耗材避免污染。
(二)PCR扩增
将待测样本与标准品同步加入反应体系。
按以下程序运行荧光定量PCR仪:
预变性:95℃ 5分钟
循环阶段:95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟(40循环)
通过标准曲线计算目的基因与参照基因拷贝数比值,获得定量结果。
注意事项
实验需在符合生物安全标准的实验室进行。
避免试剂反复冻融,开封后尽快使用。
阳性对照需与其他组分分区域操作,防止污染。
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