蔗糖磷酸合成酶(SPS)测定试剂盒/分光光度法/24样
测定意义:
蔗糖不仅是重要的光合产物,也是植物体内运输的主要物质,还是碳水化合物的贮存形式之一。SPS(EC 2.4.1.14)以果糖-6-磷酸为受体,形成的蔗糖磷酸在蔗糖磷酸酶的作用下形成蔗糖。一般把蔗糖磷酸酯合成酶-蔗糖磷酸酶系统看作是蔗糖合成的主要途径。
测定原理:
蔗糖磷酸合成酶催化果糖-6-磷酸形成蔗糖磷酸,蔗糖磷酸与间苯二酚反应可呈现颜色变化,在 480nm 下有特征吸收峰,酶活力大小与颜色的深浅成正比。
需自备的的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。测定步骤:
试剂名称(μL)
测定管
对照管
标准管
空白管
样本
30
蒸馏水
150
180
试剂二
试剂一
混匀,25℃准确水浴 10min
试剂三
50
沸水浴中煮沸 10min 左右(盖紧,以防止水分散失),冷却
试剂四
700
试剂五
200
混匀,沸水浴 30min ,冷却后, 480nm 下测定各管吸光值。标准管和空白管只要做一管。每个测定管需要设一个对照管。
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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