白色念珠菌染料法荧光定量PCR试剂盒

白色念珠菌染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于SYBR Green I染料法荧光定量PCR技术，专用于白色念珠菌（Candida albicans）的快速、高灵敏度检测与定量分析。适用于临床样本、环境样本或科研中真菌DNA的精准检测，具备全仪器平台兼容性，支持定性和定量分析。

试剂盒组分

2×荧光PCR预混液：含优化缓冲体系、dNTPs、热启动Taq DNA聚合酶及SYBR Green I染料。

阳性对照：冻干或液体形式的标准DNA片段（浓度梯度为10²~10⁷拷贝/μL），需按说明书稀释使用。

阴性对照：无核酸酶水，用于排除污染。

模板稀释液：用于标准品梯度稀释。

操作步骤

1. 样本准备

提取待测样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL。

阳性对照需按10倍梯度稀释（如10⁷~10²拷贝/μL），操作需在独立洁净区域进行，避免交叉污染。

2. PCR反应体系配制（20 μL体系）

| 组分 | 体积（μL） |

| 2×预混液 | 10 |

| 正向/反向引物 | 各0.4 |

| DNA模板 | 2 |

| 无核酸酶水 | 补至20 |

3. PCR扩增程序

| 步骤 | 温度/时间 | 循环数 |

| 预变性 | 95℃, 3 min | 1 |

| 变性 | 95℃, 15 s | 40 |

| 退火/延伸* | 60℃, 30 s | |

| 熔解曲线分析 | 60~95℃ | 1 |

*注：退火温度需根据引物Tm值优化。

性能参数

灵敏度：可检测低至10拷贝/μL的白色念珠菌DNA。

特异性：引物经严格设计，不与近平滑念珠菌等其他常见真菌交叉反应。

线性范围：10²~10⁷拷贝/μL（R²≥0.99）。

重复性：CV值<5%（高、中、低浓度模板）。

注意事项

阳性对照需单独操作，避免污染。

熔解曲线需呈现单一峰值，非特异性扩增需重新优化条件。

本产品仅限科研使用，临床诊断需经额外验证。

试剂保存：-20℃避光长期储存，避免反复冻融。

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