非洲绿猴肾细胞基因组DNA残留探针法荧光定量PCR试剂盒(不含内参)
商品属性
产品名称 | 非洲绿猴肾细胞基因组DNA残留探针法荧光定量PCR试剂盒(不含内参) | 英文名称 | African Green Monkey Kidney Cell Genomic DNA Residue Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit (Without Internal Control) |
规格 | 50T | 货号 | PR4802 |
产品概述
本试剂盒基于TaqMan探针法荧光定量PCR技术，专用于检测Vero非洲绿猴肾细胞基因组DNA残留，适用于科研领域中的定性或定量分析。试剂盒包含优化的引物探针组合、阳性对照及反应体系，灵敏度高（检测下限达1×10^1拷贝/μL），特异性强，可有效避免与其他微生物DNA的交叉反应。
产品组成
| 成分 | 规格 | 主要功能 |
| 探针法qPCR缓冲液 | 500 μL | 提供反应缓冲环境 |
| 探针法qPCR酶混合液 | 50 μL | 含热启动DNA聚合酶及逆转录酶 |
| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL | 标准品稀释及样本制备 |
| PCR引物-探针干粉 | 50次反应 | 特异性扩增目标DNA |
| PCR阳性对照（10^7拷贝/μL） | 50 μL | 标准曲线建立及质控 |
操作流程
1. 标准曲线制备
使用阳性对照进行10倍梯度稀释（10^1–10^6拷贝/μL），独立操作以避免污染。
标记离心管（1–6号），依次加入稀释液并混匀，冰上保存备用。
2. 样本DNA提取
建议使用商品化DNA提取试剂盒，设置阴性/阳性对照（N+2样本数）。
3. qPCR反应设置（20 μL体系）
定量分析：需检测N+9管（含6个标准曲线点）。
定性分析：仅需检测1个标准点（如10^4拷贝/μL）。
反应参数：
逆转录：50℃ 10 min
预变性：95℃ 10 min
扩增循环（40×）：95℃ 15 sec → 60℃ 60 sec（采集FAM通道信号）
4. 数据分析
定量：以Ct值对log浓度绘制标准曲线，计算样本浓度。
定性：Ct≤39为阳性，≥40为阴性，39–40间需复测。
注意事项
分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需在不同区域进行，避免交叉污染。
质量控制：
阴性对照Ct≥40，阳性对照Ct≤39且扩增曲线正常。
若结果异常，检查提取效率或污染风险。
保存与运输：
试剂盒-20℃避光保存，有效期12个月；
样本短期-20℃保存，长期需-70℃，运输使用2–8℃冰袋。
局限性声明：
检测结果受样本质量、提取方法及操作规范影响；
不可用于临床诊断，仅供科研用途。
适用仪器
兼容ABI、Bio-Rad、LightCycler等主流荧光定量PCR仪。
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