中国仓鼠卵巢细胞基因组DNA残留探针法荧光定量PCR试剂盒(不含内参)
商品属性
产品名称 | 中国仓鼠卵巢细胞基因组DNA残留探针法荧光定量PCR试剂盒(不含内参) | 英文名称 | Chinese Hamster Ovary (CHO) Cell Genomic DNA Residue Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit (Without Internal Control) |
规格 | 50T | 货号 | PR4805 |
产品概述
本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术,专用于检测中国仓鼠卵巢细胞(CHO)基因组DNA残留,适用于生物制药质量控制、细胞培养监测等科研领域。产品具有高灵敏性(检测限低至100拷贝/反应)和特异性,可同时支持定性与定量分析,线性范围覆盖5个数量级。
产品组成
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | 探针法qPCR缓冲液 | 500 μL |
| 试剂二 | 探针法qPCR酶混合液 | 50 μL |
| 试剂三 | 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL |
| 试剂四 | PCR引物-探针干粉 | 50次反应 |
| 试剂五 | PCR阳性对照(10^7拷贝/μL) | 50 μL |
注:含阳性对照(无传染性DNA片段),不含内参基因。
操作流程
1. 标准曲线制备
稀释步骤:以10倍梯度稀释阳性对照(10^1–10^6拷贝/μL),需在独立区域操作,避免交叉污染。
标记6管(6–1号),每管加45 μL稀释液,依次加入5 μL上一步稀释液,涡旋混匀后冰上保存。
2. 样本DNA制备
建议设置阴性对照(NC,水)和阳性对照(PC,阳性稀释液)。
兼容多数商业DNA提取试剂盒,需确保样本纯度。
3. qPCR反应体系(20 μL)
定量分析:需设置N+9个反应管(样本、阴性对照、标准曲线)。
循环条件:
逆转录:50℃ 10 min(若需);
预变性:95℃ 10 min;
40循环:95℃ 15 sec → 60℃ 60 sec(采集FAM通道信号)。
4. 数据分析
定量:以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴,计算样本浓度。
定性:Ct≤39为阳性,≥40为阴性,39–40间需复测。
性能参数
灵敏度:100拷贝/反应。
特异性:不与常见微生物DNA交叉反应。
线性范围:10^1–10^6拷贝/μL。
保存与运输
保存:-20℃避光保存,有效期12个月。
运输:2–8℃冰袋运输,避免反复冻融。
注意事项
分区操作:样本处理、试剂配制、加样需在不同区域进行。
防污染措施:使用带滤芯枪头、专用工作服,实验后以10%次氯酸或75%酒精清洁台面。
质量控制:每次实验需包含阴/阳性对照,排除假阳性或假阴性结果。
局限性:结果可能受样本处理、提取效率、运输条件等因素影响,建议结合其他检测方法验证。
声明
本产品仅用于科研,不适用于临床诊断。实验操作需符合实验室生物安全规范。
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关键字: 中国仓鼠卵巢细胞基因组DNA残留;探针法荧光定量;PCR试剂盒;
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