基本信息
产品名称 | HotStart SD DNA Polymerase (10U/ul) | 货号 | P-PR1279 |
规格 | 1000U | 用途 | 仅供科研 |
英文名称：HotStart SD DNA Polymerase (10U/ul)
作用机制：热启动型DNA聚合酶，低温下酶活性被封闭，高温变性后激活，能有效抑制非特异性引物结合和扩增，提高PCR反应的特异性；同时具备良好的DNA合成活性和热稳定性。
适用样本：基因组DNA、cDNA、质粒DNA等各类DNA模板，适用于常规PCR、多重PCR、荧光定量PCR等实验。
产品概述
热启动型DNA聚合酶，通过特殊修饰使酶在低温下处于无活性状态，经高温变性步骤后激活酶活性，从而有效抑制非特异性引物结合与DNA合成，显著提高PCR反应的特异性。该酶具备高效的DNA聚合能力，能快速准确地扩增目标DNA片段，适用于各种常规PCR扩增实验，包括基因克隆、序列分析、病原检测等，为分子生物学研究提供可靠的扩增工具。
产品特点
热启动技术：通过特殊修饰使酶在低温下处于无活性状态，经高温变性步骤后激活酶活性，有效抑制非特异性引物结合与DNA合成
高特异性：显著提高PCR反应的特异性，减少非特异性扩增产物
高效扩增：具备高效的DNA聚合能力，能快速准确地扩增目标DNA片段
广泛应用：适用于各种常规PCR扩增实验，包括基因克隆、序列分析、病原检测等
操作步骤
.配制反应体系：（以25μl体系为例）
组分 体积
10×反应缓冲液 2.5μl
MgCl₂（25mM） 1.5-2.5μl（根据模板调整）
dNTPs（10mM each） 0.5μl
上游引物（10μM） 1μl
下游引物（10μM） 1μl
模板DNA 1-5μl
3173 DNA Polymerase 0.2-0.5μl
ddH₂O 补至25μl
.PCR扩增：设置循环参数 95℃预变性3min；95℃变性30s，50-65℃退火30s，72℃延伸（1min/kb），25-35个循环；72℃终延伸10min
.产物处理：扩增产物需添加Loading Buffer后进行1%琼脂糖凝胶电泳
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注意事项
试剂预处理：使用前需按照瓶身标签提示，向漂洗液中加入指定体积的无水乙醇
沉淀处理：若裂解液、结合缓冲液出现沉淀，可在37℃水浴中加热溶解，摇匀后再使用
操作环境：实验需在洁净环境中进行，避免样本交叉污染；所有离心步骤均在室温下完成
试剂保存：试剂盒未开封时，可在15~25℃干燥环境下保存12个月；开封后蛋白酶K需置于-20℃保存，避免反复冻融
安全防护：若试剂接触皮肤或黏膜，需立即用大量自来水冲洗
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