基本信息
产品名称 | RAPA HiFi DNA Polymerase(5U/ul) | 货号 | P-PR1276 |
规格 | 500U | 用途 | 仅供科研 |
英文名称：RAPA HiFi DNA Polymerase (5U/ul)
作用机制：高保真DNA聚合酶，具备3'-5'核酸外切酶活性，可在DNA合成过程中切除错配碱基，大幅降低扩增错误率，同时具备高效的DNA合成能力和热稳定性，适用于长片段DNA扩增。
适用样本：各类DNA模板，包括基因组DNA、cDNA、质粒DNA等，适用于基因克隆、定点突变、长片段PCR扩增等对保真性要求高的实验。
产品概述
基于RAPA技术开发的高保真DNA聚合酶，拥有超强的3'-5'核酸外切酶活性（校对活性），能极大降低DNA扩增过程中的碱基错配率，保真度显著高于普通Taq DNA聚合酶。该酶具有高效的聚合能力，可快速扩增DNA片段，适用于对扩增产物准确性要求较高的实验，如基因测序、定点突变、基因克隆、构建高保真DNA文库等，为精准分子生物学研究提供有力支持。
产品特点
超保真性能：保真度约为普通Taq酶的280倍，大幅降低碱基错配率
高效扩增能力：延伸速度可达6kb/min，15秒即可完成1kb片段扩增
长片段扩增优势：可轻松扩增20kbλDNA、8kb基因组DNA和cDNA片段
强模板兼容性：能有效处理GC含量65%以上的复杂模板
操作步骤
一、试剂预处理
取出洗涤液Ⅰ和洗涤液Ⅱ浓缩液，按试剂瓶标注比例加入无水乙醇，充分混匀后备用
将洗脱液置于65℃水浴锅中预热
二、水样处理与核酸富集
取10mL预处理后的水样（杂质较多的水样需先经0.45μm滤膜过滤）加入50mL洁净烧杯
依次加入0.5mL核酸富集因子、5mL病毒裂解液及50μL消化液，充分搅拌混匀
将烧杯置于65℃水浴中孵育15分钟，期间每隔5分钟搅拌一次
三、核酸纯化与洗脱
向烧杯中加入15mL异丙醇，充分搅拌混匀后，将混合液转移至连接富集吸附柱的50mL注射器针筒内
静置2分钟后，开启真空抽滤装置，将液体缓慢抽滤至富集吸附柱内（注意不要抽干）
向针筒内加入5mL洗涤液Ⅰ，静置2分钟后抽滤；再加入5mL洗涤液Ⅱ，静置2分钟后抽滤，重复洗涤液Ⅱ步骤1次
取下富集吸附柱，放入收集管中，12000rpm常温离心3分钟，去除残留洗涤液
将吸附柱转移至新的收集管，加入50-100μL预热的洗脱液，静置2分钟后12000rpm离心2分钟
收集管中的液体即为纯化后的病毒核酸，可直接用于下游实验或-70℃保存
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注意事项
试剂保存：试剂盒应避光保存于2-8℃，有效期12个月；核酸富集因子避免反复冻融，使用后立即放回冰箱
水样预处理：高浊度或杂质过多的水样，需先经0.45μm滤膜过滤，避免堵塞吸附柱
操作规范：实验全程佩戴手套、口罩、护目镜等防护用品，避免直接接触水样与试剂；若不慎接触皮肤或眼睛，立即用大量清水冲洗
试剂配制：洗涤液需现用现配，按比例加入无水乙醇后充分混匀，未使用的稀释液可在2-8℃保存1个月
核酸保存：提取的核酸若长期保存，需置于-70℃环境，避免反复冻融；短期可在4℃保存24小时
器材要求：所有实验器材需为无RNA酶耗材，实验前可经180℃干烤6小时或用RNA酶清除剂处理
关键字： RAPA HiFi DNA Polyme;
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