基本信息
中文名称：3173 DNA Polymerase(5U/ul))
货号：P-PR1283
规格：500U
英文名称：3173 DNA Polymerase (5U/μl)
作用机制：一种高保真DNA聚合酶，具有3'→5'外切酶活性，可纠正DNA合成过程中的碱基错配；同时具有链置换活性，可用于等温扩增反应（如MDA）；高效扩增长片段DNA，维持高保真性与扩增效率。
适用样本：长片段DNA扩增、等温扩增体系、高保真基因克隆
产品概述
这是一款高纯度的DNA聚合酶，具有5’-3’聚合酶活性与弱3’-5’外切酶活性，兼具一定的保真性与扩增效率，适配常规PCR扩增、DNA测序反应、DNA标记等多种分子生物学实验。
产品组成
主要成分为纯化的3173 DNA聚合酶，通常随酶提供10×反应缓冲液与MgCl₂溶液（需单独添加）。
产品特点
·平衡性能：兼具一定保真性与扩增效率，弱3’-5’外切酶活性可部分修正碱基错配
·高酶活：酶活单位为5U/μl，1U酶活性定义为在适宜条件下，37℃30min内催化10nmol dNTP掺入到DNA中的酶量
·灵活适配：可根据实验需求灵活调整Mg²⁺浓度与反应体系
·广泛应用：适用于常规PCR、引物延伸反应、DNA末端标记等实验
操作步骤
.配制反应体系：（以25μl体系为例）
组分 体积
10×反应缓冲液 2.5μl
MgCl₂（25mM） 1.5-2.5μl（根据模板调整）
dNTPs（10mM each） 0.5μl
上游引物（10μM） 1μl
下游引物（10μM） 1μl
模板DNA 1-5μl
3173 DNA Polymerase 0.2-0.5μl
ddH₂O 补至25μl
.
.PCR扩增：设置循环参数 95℃预变性3min；95℃变性30s，50-65℃退火30s，72℃延伸（1min/kb），25-35个循环；72℃终延伸10min
.产物处理：扩增产物需添加Loading Buffer后进行1%琼脂糖凝胶电泳
注意事项
·Mg²⁺浓度对扩增效果影响较大，建议通过预实验优化Mg²⁺添加量
·酶需置于-20℃储存，避免反复冻融，建议分装为小体积使用
·反应体系需在冰上配制，避免酶在常温下失活
·若需进行高保真扩增，建议搭配高保真PCR缓冲液或使用专门的高保真PCR酶
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