基本信息
产品名称 | Taq FS DNA Polymerase(5U/ul) | 货号 | P-PR1282 |
规格 | 500U | 用途 | 仅供科研 |
英文名称：Taq FS DNA Polymerase (5U/ul)
作用机制：一种具有快速启动特性的Taq DNA聚合酶，在较低温度下即可启动DNA合成，缩短PCR反应的预变性时间，同时具备较高的扩增效率和热稳定性，适用于快速PCR反应。
适用样本：各类DNA模板，如基因组DNA、cDNA、质粒DNA等，适用于快速PCR扩增、高通量基因检测等实验。
产品概述
这是一款经基因工程改造的Taq（R660D/F667Y）DNA聚合酶，核心优势在于具备较强的ddNTP渗入能力，是终止法DNA测序或SNP分析的理想工具。其酶活性定义为在74℃条件下，30分钟内催化10nmol dNTP掺入酸不溶性物质所需的酶量。配套的10×TaqFS PCR Buffer若出现白色沉淀，混合均匀后不影响使用。产品在-20℃可保存3年，能在不更换现有实验室紫外观察设备的前提下，为相关实验提供高效支持。
产品特点
双脱氧核苷酸偏好：经基因工程改造，大幅提升ddNTP掺入效率
测序兼容性：完美适配Sanger测序法，峰形清晰准确
末端转移酶活性：可在PCR产物3'末端添加dA碱基，直接用于T/A克隆
高保真特性：保真度约为普通Taq酶的5倍，降低测序错误率
实验前准备
试剂与耗材检查：确认PCR预混液、上下游引物、模板DNA、无酶水等试剂在有效期内，外观无浑浊、沉淀；PCR管、枪头需为无酶无菌规格。
仪器预热：提前10-15分钟启动PCR仪，设置好反应程序，确保仪器达到预设温度。
环境准备：在超净工作台内操作，佩戴无粉手套，避免交叉污染；操作前用75%酒精擦拭台面和移液器。
反应体系配制
冰上操作：将所有试剂放置于冰盒内，避免酶失活。
体系配比（以25μL体系为例）：
PCR预混液（含Taq酶、dNTP、Buffer）：12.5μL
上游引物（10μM）：1μL
下游引物（10μM）：1μL
模板DNA：1-5μL（根据模板浓度调整）
无酶水：补足至25μL
轻柔混匀：用移液器轻轻吹吸混合液3-5次，避免产生气泡；若有气泡可短暂离心去除。
分装体系：将配制好的反应液分装至PCR管中，每管25μL，盖紧管盖。
PCR仪上机反应
程序设置：根据引物Tm值和实验需求设置三步法或两步法程序：
预变性：95℃，3-5分钟
循环阶段：95℃变性30秒，55-65℃退火30秒，72℃延伸（根据片段长度调整，1kb约1分钟），循环25-35次
终延伸：72℃，5-10分钟
保温：4℃。
上机运行：将PCR管放入PCR仪样品槽，确保管盖紧密贴合；启动程序，等待反应完成。
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注意事项
无菌操作：所有试剂和耗材需高压灭菌或无菌处理，避免外源DNA污染
温度控制：酶、dNTP等试剂需-20℃储存，避免反复冻融
体系优化：根据引物Tm值、模板类型调整Mg²+浓度和退火温度
对照设置：每次实验需设置阴性对照（无模板）和阳性对照（已知阳性模板）
关键字： Taq FS DNA Polymeras;
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