拭子DNA磁珠法提取试剂盒

基本信息‌

‌中文名称‌：拭子DNA磁珠法提取试剂盒

货号：P-PR1525

规格：50T、100T

‌英文名称‌：Swab DNA Extraction Kit (Magnetic Bead-based)
作用机制：采用磁珠法技术，从拭子样本中裂解细胞、释放DNA，磁珠特异性结合DNA，去除拭子中的杂质和抑制剂，得到纯净的DNA。 

适用样本：口咽拭子、鼻咽拭子、肛拭子等各类拭子样本。
产品概述

本试剂盒采用具有独特分离作用的磁珠和专属缓冲液系统，可从口腔拭子、咽拭子等各类拭子样本中分离纯化高质量基因组DNA。整个提取过程安全便捷，无需酚类抽提与复杂离心操作，获得的DNA片段大、纯度高、质量稳定，可直接用于酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等常规分子生物学实验，同时兼容手工提取与高通量自动化平台批量提取。

试剂盒组成（以50次反应规格为例）

组分名称 规格 作用说明

组织消化液GHA 50mL 裂解样本细胞，释放基因组DNA

缓冲液GHC 20mL 调节体系条件，助力DNA与磁珠结合

去蛋白液PD 20mL 去除样本中的蛋白质杂质

漂洗液PWD 20mL 洗涤磁珠上吸附的盐分、残留杂质

蛋白酶K 500μL 降解样本中的蛋白质，辅助细胞裂解

磁珠悬浮液G 500μL 特异性结合DNA，实现核酸分离

洗脱缓冲液TB 15mL 洗脱磁珠上吸附的纯化DNA

产品特点

提取高效快速：单个样本提取全程仅需45分钟，常温即可完成裂解步骤，大幅缩短实验周期

适配性广泛：既支持手工小样本提取，也可搭配各类自动化核酸提取平台实现高通量批量操作

核酸质量优异：提取的DNA OD260/OD280值稳定在1.8-2.0之间，无PCR抑制剂、蛋白、脂类等杂质残留，单个拭子样本可获得0.5~4.5μg DNA

操作安全简便：无需使用酚、氯仿等有毒有机溶剂，实验过程更安全，且对操作人员技术要求较低

实验操作步骤

（一）实验前准备

试剂配制：使用前按照瓶身标注体积，在缓冲液GHC中加入异丙醇，在漂洗液PWD中加入无水乙醇，充分混匀后备用

样本检查：确认拭子样本无霉变、污染，若样本保存时间较长，建议先观察样本状态再进行后续操作

仪器准备：准备磁力架、恒温金属浴/水浴锅、移液器、离心管等实验器具，确保器具无核酸酶污染

（二）样本处理

口腔拭子样本

将采集后的拭子转移至2mL离心管中，加入500μL组织消化液GHA和10μL蛋白酶K，涡旋振荡10秒混匀后，置于65℃环境中孵育15-30分钟，每隔10分钟涡旋混匀一次，最后取300μL处理后的样本上清液进行后续操作。

咽拭子样本

将咽拭子转移至5mL离心管中，加入1-2mL组织消化液GHA，颠倒混匀后取出300μL液体至新离心管，加入10μL蛋白酶K，涡旋振荡10秒混匀，65℃孵育30分钟（每隔10分钟混匀一次），待样本充分裂解后进行后续操作。

（三）DNA结合与纯化

向处理后的样本中加入600μL缓冲液GHC，抽打振荡或涡旋混匀

加入10μL磁珠悬浮液G（使用前需充分振荡重悬），抽打振荡混匀12分钟

将离心管放置于磁力架上静置30秒，待磁珠完全吸附后，小心吸弃上清液（避免触碰磁珠）

将离心管从磁力架取下，加入900μL去蛋白液PD，抽打振荡混匀3分钟，再次置于磁力架上吸附磁珠并弃去上清，重复此步骤1次

向吸附柱中加入900μL漂洗液PWD，抽打振荡混匀3分钟，置于磁力架上吸附磁珠后弃去上清，重复此步骤1次

将离心管留在磁力架上，室温开盖静置10-15分钟，彻底挥发残留乙醇

（四）DNA洗脱

将吸附有磁珠的离心管从磁力架取下，加入50-100μL洗脱缓冲液TB，抽打振荡混匀后置于56℃环境孵育10分钟（期间颠倒混匀3次）

将离心管放回磁力架上静置2分钟，待磁珠完全吸附后，小心将上清液转移至新的无菌离心管中，即为纯化后的基因组DNA

提取的DNA可立即用于下游实验，或置于-20℃环境长期保存

注意事项

样本保存：样本应避免反复冻融，若无法及时提取，可保存在专用拭子保存液中，4℃环境可短期保存，-20℃环境可长期保存

试剂使用：若缓冲液出现沉淀，可在室温条件下静置溶解后摇匀使用；蛋白酶K需置于-20℃环境保存，避免反复冻融导致活性降低

操作规范：实验过程中需佩戴手套、口罩，使用无菌无酶耗材，避免样本交叉污染；磁珠吸附过程中需确保磁珠完全沉淀后再吸弃上清

结果优化：若提取的DNA纯度偏低，可增加漂洗液洗涤次数；若DNA产量不足，可适当增加样本起始量或延长孵育裂解时间

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