基本信息
中文名称：中大量质粒富集提取试剂盒
货号：P-PR1492
规格：40T、60T
英文名称：Medium-to-large Scale Plasmid Enrichment Extraction Kit
作用机制：优化碱裂解法与沉淀体系，从大体积菌液中高效释放质粒DNA；利用PEG沉淀法初步富集质粒，再结合离子交换层析或磁珠纯化技术，去除宿主DNA、RNA、内毒素等杂质；最终获得高浓度、高纯度的质粒DNA，适配基因治疗、蛋白表达等大规模实验。
适用样本：大肠杆菌培养的中大规模质粒菌液（≥100ml）
产品概述
本试剂盒采用改进的碱裂解法结合独特的杂质清除技术，可从大量细菌培养液中高效富集和纯化质粒DNA。提取过程无需使用酚、氯仿等有毒试剂，获得的质粒DNA纯度高、超螺旋比例高、内毒素含量低，能直接用于细胞转染、基因编辑、测序等高精度下游实验。
产品组成
组分名称 规格（20次装） 功能说明
溶液P1 150mL 悬浮菌体，抑制核酸酶活性
溶液P2 120mL 裂解菌体，释放质粒DNA
溶液PⅢ 130mL 中和裂解液，沉淀蛋白质
杂质清除剂 50mL 特异性结合并去除内毒素和杂质
结合液 200mL 调节体系，促进质粒结合硅胶柱
洗涤液Ⅰ 300mL 去除大部分蛋白质和RNA杂质
洗涤液Ⅱ 300mL 去除盐离子和残留小分子杂质
洗脱液 100mL 从硅胶柱上解离纯化的质粒DNA
RNase A 2mL 降解体系中的RNA杂质
硅胶纯化柱 20个 特异性吸附质粒DNA
50mL收集管 20个 收集纯化过程中的流出液
产品特点
高效富集：从200-250mL大肠杆菌培养液中可富集800-1500μg高拷贝质粒DNA
低内毒素：内毒素含量低于0.05EU/μg DNA，满足敏感细胞系转染和动物实验需求
高完整性：对大型质粒（10kb以上）的提取效果优异，DNA断裂少，完整性好
操作简便：无需酚氯仿抽提和乙醇沉淀，整个提取过程约1.5小时
操作步骤
菌体收集：取200-250mL对数生长期的菌液，5000g离心10分钟，弃尽上清
菌体悬浮：加入10mL溶液P1，彻底悬浮菌体沉淀，确保无结块
菌体裂解：缓慢加入10mL溶液P2，温和颠倒离心管4-6次，室温静置5分钟，至溶液变清亮
中和沉淀：缓慢加入10mL溶液PⅢ，温和颠倒离心管6-8次，室温静置10分钟，此时出现白色絮状沉淀
杂质清除：加入5mL杂质清除剂，充分混匀，室温静置10分钟，12000g离心10分钟，将上清液小心转移至新离心管
质粒结合：加入0.7倍体积的结合液，充分混匀，将混合液分批加入硅胶纯化柱，8000g离心2分钟，弃流出液
洗涤纯化：加入10mL洗涤液Ⅰ，8000g离心2分钟，弃流出液；加入10mL洗涤液Ⅱ，8000g离心2分钟，弃流出液，重复洗涤一次
干燥柱体：将纯化柱置于新的50mL收集管中，12000g离心5分钟，彻底去除残留的洗涤液
质粒洗脱：向纯化柱中加入5-10mL预热至65℃的洗脱液，室温静置5分钟，12000g离心5分钟，收集管中即为纯化的质粒DNA
注意事项
提取低拷贝质粒时，需加倍使用菌液量，并按比例增加所有试剂的用量
处理大型质粒时，操作动作要轻柔，使用大口径吸头，避免机械剪切导致DNA断裂
杂质清除剂需在使用前充分摇匀，确保清除效果
纯化后的质粒DNA可在-20℃保存1年，避免反复冻融
公司正在出售的产品
人乳头瘤病毒12 PCR试剂盒 | 肉芽肿性曼氏杆菌病PCR检测试剂盒 |
玉米CBH- PCR检测试剂盒 | 神经细胞粘附分子配体1ELISA试剂盒 |
斑蝥染料法PCR鉴定试剂盒 | Heterotaxy1蛋白ELISA试剂盒 |
鼻咽癌病毒PCR检测试剂盒 | 禽杯状病毒RT-PCR试剂盒 |
罗布罗布芽生菌PCR试剂盒 | 住白细胞原虫属通用PCR检测试剂盒 |
禽腺病毒E型PCR试剂盒 | 嗜冷黄杆菌PCR检测试剂盒 |
青霉通用PCR检测试剂盒 | 地霉属通用PCR试剂盒 |
卵形疟原虫PCR检测试剂盒 | 小麦矮腥黑穗病菌PCR试剂盒 |
漏斗状带绦虫PCR试剂盒 | 眼蜱通用PCR检测试剂盒 |
禽疱疹病毒2型PCR试剂盒 | 登革病毒通用PCR检测试剂盒 |
猪牛羊布鲁氏菌病PCR检测试剂盒 | 狄斯瓦螨PCR检测试剂盒 |
蛋白激meiC | 亚利桑那沙门氏菌PCR检测试剂盒 |
布鲁东氏酪氨suan激meiELISA试剂盒 | 中大量质粒富集提取试剂盒抗P62抗体ELISA试剂盒 |
冠蛋白2BELISA试剂盒 | IgG-Fc片段受体ⅠELISA试剂盒 |
层粘连蛋白γ1ELISA试剂盒 | MRG结合蛋白ELISA试剂盒 |
关键字： 中大量质粒富集提取试剂盒;Medium-to-large Scal;
派瑞曼pyram?是上海博湖生物科技有限公司（Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.，China）的产品品牌。
派瑞曼pyram?是一家化学、生化和材料科学等领域的科研用研发产品的制造商和供应商,我们的产品在相当宽的基础科学领域得到广泛的应用。 客户包括学术界、工业界和政府的研究和开发实验室以及制药、生物技术、化工/石化行业等具商业规模的企业。
派瑞曼pyram?除包括化学、分析化学、生命科学、材料科学和病理科学产品。质量是所有产品和服务最关键的组成部分,我们通过质量和实力赢得客户的信赖。产品的质量是企业的生命。
公司秉承"专注品质、诚信为本、服务至上、合作共赢"的企业文化积极参与生物领域的技术创新和技术服务,力求为我国科研事业更好的,更专业的服务！