大鼠阿立新A(Orexin A)ELISA试剂盒

竞争型 ELISA 检测体系，微孔板预包被 Orexin A 多肽抗原，样本内源阿立新 A 与固相抗原竞争结合 HRP 标记抗 Orexin A 抗体，孵育洗涤后底物显色，显色深浅与样本 Orexin A 浓度负相关，标准曲线定量神经肽含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测灵敏度≤0.1pg/mL

检测范围：0.2pg/mL - 100pg/mL

反应时间：室温孵育120分钟，二抗反应60分钟，避光显色15分钟

保存条件：2-8℃避光冷藏，浓缩试剂密封保存，防止挥发、结晶

有效期：原装未拆封有效期6个月

显色系统：TMB底物显色体系，酸性终止液终止反应

检测波长：450nm波长检测吸光度

标准曲线绘制：倍比稀释标准品，检测对应OD值，四参数拟合标准曲线，换算样本Orexin A含量

特异性：特异性识别大鼠阿立新A，与阿立新B无交叉反应，无物种交叉特异性结合

重复性：板内CV≤6%，板间CV≤8%，重复性良好

注意事项：1. 脑脊液、血清样本需低温保存，避免降解；2. 实验全程避光操作，保护活性试剂；3. 洗板机洗板压力适中，避免冲坏包被孔底；4. 实验耗材需无菌无酶，避免蛋白降解。
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果

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实验操作流程：

试剂平衡：全部试剂室温放置 28min，浓缩洗涤液 1:20 稀释，避光操作避免多肽降解。

标准品配制：Orexin A 冻干标准品轻柔溶解，梯度稀释 7 个浓度梯度。

加样：标准孔 50μL 标准品，下丘脑匀浆、脑脊液样本 50μL 加入检测孔。

酶抗体孵育：每孔 50μL HRP-Orexin A 抗体，密封 37℃避光孵育 67min。

洗板：洗涤液浸泡 35s，拍干，洗板 6 次。

显色：底物 A、B 各 50μL，避光 37℃显色 18min。

终止读数：终止液摇匀，9min 内 450nm 检测，计算阿立新 A 浓度。