本试剂盒依托双抗体夹心ELISA技术原理，酶标板微孔包被纯化的人CDK-1特异性抗体，加入标准品和待测细胞、组织样本后，样本中的周期素依赖性激酶1与固相抗体特异性结合，孵育洗涤后加入HRP标记检测抗体，形成固相抗体-抗原-酶标抗体三元复合物，显色深浅与CDK-1含量正相关，通过标准曲线完成定量检测。
基本参数：
产品名称：人周期素依赖性激酶1(CDK-1)ELISA试剂盒
英文名称：CDK-1 Elisa Kit
货号：Y-E887
规格：48T/96T
灵敏度：检测限 0.14ng/mL
检测范围：0.28ng/mL - 17.92ng/mL
反应时间：一抗孵育 39min，二抗 39min，显色 12min
保存条件：试剂盒 2-8℃，洗涤浓缩液室温存放
显色系统：TMB A/B 液混合显色
检测波长：450nm 校正 650nm
标准曲线绘制：四参数 Logistic 法构建标准曲线方程
注意事项：细胞周期样本需同步化处理后再裂解，避免周期异质性导致结果偏差
关键注意事项：
本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。
终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。
终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：
试剂室温静置 30min，稀释配制 CDK-1 标准品系列梯度，细胞周期蛋白裂解液稀释待测，标注酶标板孔位信息。
空白孔加稀释缓冲液，标准孔依次添加梯度 CDK-1 标准溶液，样本孔加入待测细胞裂解样本。
一步法直接添加酶联抗体工作液至所有微孔，省略分步孵育，低速震荡混匀 15s。
封板密封，37℃避光孵育 65min，全程避光存放酶标板。
去除封板倒掉孔内液体，洗板液浸泡每孔 33s，重复洗板 5 次并拍干微孔。
避光加入 TMB 显色液，室温避光显色 16min，观察梯度蓝色色差。
终止液终止反应，450nm 波长读数，绘制标准曲线计算 CDK-1 激酶含量。
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