本试剂盒基于双抗体夹心ELISA原理，酶标板微孔固定人周期素依赖性激酶4特异性捕获抗体，加入标准品和待测样本后，样本中的CDK-4抗原与固相抗体特异性免疫结合，洗板去除游离杂质，加入HRP标记的CDK-4检测抗体形成稳定免疫复合物，底物显色后终止反应，依据OD值与抗原浓度的线性关系，结合标准曲线定量检测CDK-4浓度。
基本参数：
产品名称：人周期素依赖性激酶4(CDK-4)ELISA试剂盒
英文名称：CDK-4 Elisa Kit
货号：Y-E3045
规格：48T/96T
灵敏度：检出下限 0.11ng/mL
检测范围：0.22ng/mL - 14.08ng/mL
反应时间：孵育 46min、36min，避光显色 18min
保存条件：2-8℃冷藏，开封微孔板条装入自封袋加干燥剂
显色系统：稳定型 TMB 单组份显色液
检测波长：450nm
标准曲线绘制：非线性拟合标准曲线，精准定量激酶蛋白表达量
注意事项：肿瘤细胞裂解样本避免反复冻融，蛋白构象改变会降低结合能力
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：
试剂盒室温平衡 29min，梯度稀释 CDK-4 标准品，组织细胞匀浆上清稀释待测，划分酶标板孔位类型。
精准加样至对应微孔，空白孔添加样本稀释缓冲液，标准孔加梯度 CDK-4 标准液，样本孔加入待测匀浆样本。
一步法直接加入酶结合特异性抗体工作液至所有反应孔，轻晃酶板混匀液体。
封板膜封闭酶标板，37℃恒温避光孵育 66min，避光孵育避免酶失活。
撕开封板倒掉废液，洗板液浸泡每孔 30s，连续洗板 4 次并彻底拍干微孔。
避光滴加显色 AB 底物液，室温显色 15min，依据标准品颜色梯度终止反应。
终止液终止反应，450nm 读取 OD 值，标准曲线换算 CDK-4 蛋白含量。
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