本试剂盒依托双抗体夹心ELISA核心原理，固相酶标板微孔包被抗人周期素依赖性激酶7特异性抗体，加入标准品及待测样本后，样本中的CDK-7抗原与固相抗体特异性结合，洗涤去除未结合物质，加入HRP标记的CDK-7检测抗体形成夹心免疫复合物，显色深浅与CDK-7含量成正比，终止反应后检测OD值，结合标准曲线完成定量检测。
基本参数：
产品名称：人周期素依赖性激酶7(CDK-7)ELISA试剂盒
英文名称：CDK-7 Elisa Kit
货号：Y-E885
规格：48T/96T
灵敏度：检测限 0.13ng/mL
检测范围：0.26ng/mL - 16.64ng/mL
反应时间：总操作 106min，温育 46min、40min，显色 20min
保存条件：试剂盒 2～8℃避光密封储存
显色系统：HRP-TMB 显色终止体系
检测波长：450nm 单波长测定
标准曲线绘制：四参数拟合生成标准曲线用于样本浓度换算
注意事项：转录相关蛋白易被核酸干扰，样本需去除基因组核酸后上样
通用注意事项：
样本要求
血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。
温度控制
孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。
避光操作
TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。
洗板规范
洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。
污染防控
实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。
安全防护
终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。
失效判定
试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。
稀释校正
样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。
空白对照
空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。
储存禁忌
试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：
试剂盒室温回温 30min，倍比稀释 CDK-7 标准品，细胞核蛋白裂解液稀释待测，标注酶标板各孔用途。
垂直枪头加样，空白孔添加稀释缓冲液，标准孔加梯度 CDK-7 标准溶液，样本孔加入待测核蛋白样本。
一步法直接添加酶标记抗体工作液至所有微孔，手动轻拍酶板混匀孔内液体。
封板封口，37℃湿盒避光孵育 64min，维持孵育湿度防止液体浓缩。
去除封板倾倒废液，洗板液浸泡每孔 28s，重复洗板 5 次并吸水纸拍干微孔。
避光滴加 TMB 显色液，室温避光显色 14min，观察梯度色差把控终止时机。
终止液终止显色，450nm 波长读数，计算样本 CDK-7 表达浓度。
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