本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测原理，在酶标板微孔中固定有抗人总前列腺特异抗原（tPSA）特异性单克隆抗体。检测时，样本与标准品中的tPSA抗原可与微孔内固相抗体特异性结合，洗涤去除游离杂质后，加入酶标记的抗tPSA抗体，构建固相抗体-抗原-酶标抗体三明治复合物。再次洗涤洗净未结合组分后，加入TMB显色底物，酶促反应使底物显色，终止液终止反应后稳定显色结果。通过检测450nm处吸光度数值，依据吸光度与tPSA抗原含量的正相关关系，拟合标准曲线即可定量测定样本中总前列腺特异抗原的含量。
基本参数：
产品名称：人总前列腺特异抗原(tPSA)ELISA试剂盒
英文名称：tPSA Elisa Kit
货号：Y-E743
规格：48T/96T
灵敏度：最低检测限 0.02ng/mL
检测范围：0.05ng/mL～40ng/mL
反应时间：一抗包被板样本温育 90min，二抗结合 45min，避光显色 20min，终止后 5min 内完成检测，全程约 160min
保存条件：试剂盒整体 2～8℃冷藏；浓缩洗涤液室温存放即可，显色液必须避光 2～8℃保存，禁止反复冻融
显色系统：双组份 A+B TMB 显色体系，临用前等量混合配制
检测波长：单波长 450nm 直接测定
标准曲线绘制：标准品梯度稀释 7 个浓度点，OD 值采用线性回归拟合标准曲线计算样本浓度
注意事项：溶血、脂血样本会严重干扰检测结果；加样顺序严格遵循说明书，不可颠倒酶标试剂与底物添加顺序。
关键注意事项：
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）
避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果
显色过程需避光，避免阳光直射影响结果
实验步骤如下：
试剂盒所有组分室温放置 30min 回温，稀释浓缩洗涤液至工作浓度，配制 tPSA 系列标准品。
酶标板设定标准品孔、样本孔、阴性对照孔，精准加样，每孔加样后轻敲板边混匀。
无需洗板，直接向全部反应孔加入辣根过氧化物酶标记抗体工作液，封板。
37℃湿盒内避光孵育 45min，结束后倾倒孔内液体，洗板 4 次，每次浸泡 25s，吸水纸拍净残留液体。
每孔加入显色混合底物，遮光环境下 37℃显色 12min，严控显色时长避免过曝。
按顺序加入终止液终止反应，水平摇晃酶标板使液体充分混匀。
酶标仪双波长检测 OD 数值，拟合标准曲线，换算待测样本 tPSA 含量并记录数据。
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