小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理，微孔板固相固定有小鼠可溶性Endoglin（ENG/sCD105）特异性抗体。检测时，样本与标准品中的sCD105抗原与固相捕获抗体特异性结合，洗涤去除非特异性结合成分后，加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体，构建完整的免疫复合物。经洗涤纯化后加入TMB底物启动显色反应，显色强度与样本中sCD105含量正相关，终止反应后测定吸光度，对照标准曲线即可完成定量检测。
基本参数‌：

产品名称：小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA试剂盒

英文名称：ENG/sCD105 ELISA Kit
货号：Y-E2122

规格：48T/96T

灵敏度：最小检出 0.05ng/mL

检测范围：0.1ng/mL～42ng/mL

反应时间：室温样本孵育 98min，酶结合物 58min，避光显色 23min，终止读数，总时长 179min

保存条件：试剂盒 2～8℃；浓缩洗涤液常温保存，稀释后洗涤液 24h 内使用完毕

显色系统：双组份 TMB 临用前配比混合显色

检测波长：450nm 参考 620nm

标准曲线绘制：半对数坐标构建标准曲线，用于样本浓度换算

注意事项：血管组织匀浆去除血凝块杂质；终止液切勿沾染皮肤与衣物。
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

试剂盒室温回温 23min，稀释洗涤工作液，配制 sCD105 标准梯度液。

酶标板精准加样标准品、小鼠血浆样本、空白对照，无交叉污染。

直接添加酶标记抗体，封板 37℃孵育 59min。

洗板 5 次，浸泡 30s 每轮，充分拍干废液。

显色底物避光显色 14min。

终止液终止反应，震荡混匀。

依据标准曲线计算可溶性 Endoglin 含量。
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