双抗体夹心免疫酶联吸附,酶标板包被抗大鼠 PⅠNP 捕获抗体,样本胶原合成标志物 PⅠNP 固定于板底,加入酶标记检测抗体,洗涤显色后测定吸光度,对照标准曲线定量样本 PⅠNP 含量。
产品参数:
产品名称 | 大鼠Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1034 |
英文名称 | NP ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测浓度0.2ng/mL,精准反映胶原合成水平
检测范围:0.4ng/mL - 40ng/mL
反应时间:总时长90分钟,样本孵育60分钟,二抗孵育30分钟
保存条件:2-8℃避光冷藏,标准品开封后分装-20℃保存
有效期:原装试剂盒6个月,分装样本3个月有效
显色系统:高灵敏TMB显色系统,低背景高精准度
检测波长:450nm、630nm双波长校正检测
标准曲线绘制:6浓度梯度,四参数拟合,R²≥0.997
特异性:专一靶向PⅠNP,与各类胶原降解肽段无交叉反应
重复性:板内CV≤4.6%,板间CV≤6.6%
注意事项:样本低温保存,防止前肽降解;加样精准,避免孔间误差;洗涤充分,去除非特异性结合
关键注意事项:
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
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实验操作流程:
试剂平衡:试剂盒室温平衡 30min,20× 洗涤液稀释,血清样本无脂血溶血。
标准品稀释:PⅠNP 冻干标准品复溶梯度稀释 6 组,空白对照孔。
加样孵育:每孔 50μL 标准品 / 样本,酶结合物 50μL,37℃避光密封孵育 66min。
洗板操作:洗涤液浸泡 36s,彻底拍干,洗板 6 次。
底物显色:底物 A、B 各 50μL,避光孵育 18min。
终止读数:终止液混匀,10min 内 450nm 读数。
数据计算:标准曲线计算 PⅠNP,反映骨胶原合成速率。
关键字: 大鼠Ⅰ型前胶原N端前肽;PⅠNP;ELISA试剂盒;
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