本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理,包被纯化的大鼠OFQ/N特异性抗体于酶标板微孔,样本中的孤腓肽抗原与包被抗体特异性结合,随后加入酶标记检测抗体形成夹心免疫复合物,经显色反应及终止处理后,检测各孔吸光度,吸光度与样本中OFQ/N浓度呈正相关,以此定量计算样本抗原含量。
产品参数:
产品名称 | 大鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1135 |
英文名称 | OFQ/N ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测浓度≤5pg/mL
检测范围:10pg/mL - 500pg/mL
反应时间:总反应时长140分钟(样本温育80分钟、酶二抗温育30分钟、显色30分钟)
保存条件:2-8℃避光冷藏,标准品-20℃分装保存,避免反复冻融
有效期:未开封有效期6个月,开封后1个月内用完
显色系统:高灵敏度TMB显色体系,显色稳定、背景低
检测波长:450nm/630nm双波长校正
标准曲线绘制:四参数拟合标准曲线,R²≥0.990
特异性:特异性识别大鼠孤腓肽,与内啡肽、强啡肽等阿片肽家族因子无交叉反应
重复性:板内CV≤6%,板间CV≤8%
注意事项:脑组织样本需低温匀浆处理,全程冰上操作;样本避免反复冻融,防止肽类降解
储存与有效期:
未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
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实验操作流程:
试剂室温放置 30min,复溶冻干 OFQ/N 标准品配制系列浓度梯度,标记酶标板各类孔位。
一步法直接上样,标准孔加梯度标准品 100μL,待测孔加入大鼠脑脊液稀释样本 100μL,空白孔补稀释液。
封板密闭,37℃恒温孵育 70min,完成抗原抗体固相结合反应。
弃去孔内液体,洗涤液浸润每孔 30s 后甩干,循环洗板 5 次,去除游离未结合组分。
检测孔加入酶标记特异性抗体工作液 100μL,避光封板,37℃孵育 26min。
分加显色 A 液、B 液各 50μL,轻微震荡混匀,37℃避光显色 13min。
滴加终止液终止显色,酶标仪 450nm 测定吸光度,计算样本 OFQ/N 含量。
关键字: 大鼠孤腓肽;OFQ/N;ELISA试剂盒;
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