本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附法原理,酶标板包被大鼠sP-selectin捕获抗体,待测样本中的sP-selectin抗原可特异性结合固相抗体,洗板去除游离杂质后,加入酶标记检测抗体构建夹心免疫复合物,经显色、终止反应后检测吸光度,吸光度值与样本sP-selectin含量正相关,依托标准曲线精准定量目标蛋白水平。
基本参数:

产品名称:大鼠可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA试剂盒
英文名称:sP-selectin ELISA Kit
货号:Y-E1419
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测浓度小于1.0 pg/mL
检测范围:4 pg/mL - 150 pg/mL
反应时间:全程120分钟(样本孵育60min、酶标孵育30min、显色30min)
保存条件:2-8℃避光干燥保存,不可冷冻,冷冻会导致抗体失活
有效期:未开封12个月,开封后试剂4℃保存,20天内使用完毕
显色系统:高灵敏度TMB显色体系,显色均匀、背景值低
检测波长:450nm,推荐630nm参比校准
标准曲线绘制:六梯度标准品拟合,四参数曲线模型,R²≥0.990
特异性:仅特异性结合大鼠sP-selectin,与其他粘附分子、选择素家族蛋白无交叉反应
重复性:板内CV≤7.5%,板间CV≤9.5%
注意事项:血小板激活会影响样本检测结果,样本采集后需快速分离上清;孵育温度恒定37℃,温差过大影响反应效率;终止液具有腐蚀性,操作需佩戴防护手套。
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

全部试剂室温回温 28min,稀释洗涤液,配制酶工作液。
酶标板设置空白、标准、质控、样本孔,依次加入稀释样品与酶标记工作液。
密封板体,37℃孵育 63min。
洗板 5 次,浸泡 28s / 次,滤纸拍干废液。
底物避光 37℃反应 14min。
终止液滴入震荡混匀终止反应。
450nm 检测吸光度,定量 sP-selectin。
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