本试剂盒依托双抗体夹心酶联免疫吸附原理,固相酶标板固定大鼠FⅡ特异性抗体,样本与标准品中的FⅡ抗原发生特异性结合,加入酶标记检测抗体形成夹心免疫复合物,显色后检测吸光度,通过标准曲线线性关系定量检测大鼠样本中FⅡ的含量。
基本参数:

产品名称:大鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA试剂盒
英文名称:FⅡ ELISA Kit
货号:Y-E1253
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测下限≤0.1ng/mL,可精准检出大鼠血浆中凝血因子Ⅱ微量含量。
检测范围:0.2ng/mL - 30ng/mL,覆盖大鼠外源性凝血通路相关样本检测区间。
反应时间:全程实验100分钟,样本孵育35min、酶孵育30min、显色20min、终止15min。
保存条件:2-8℃避光冷藏,所有凝血因子检测试剂严禁冷冻,防止蛋白失活。
有效期:未开封试剂盒有效期6个月,规范存放性能稳定。
显色系统:HRP酶标记-TMB显色体系,反应特异性强,显色均匀稳定。
检测波长:450nm主波长,630nm参比波长,校正系统检测误差。
标准曲线绘制:四参数Logistic拟合标准曲线,R²≥0.990,定量精准。
特异性:特异性识别大鼠凝血因子Ⅱ,与其他凝血因子无交叉反应。
重复性:板内CV≤8%,板间CV≤10%,批次重复性达标。
注意事项:样本采集后快速离心分离血浆,避免凝血因子降解;杜绝试剂交叉污染。
关键注意事项:

本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
实验步骤如下:

微孔板每孔加入标准品稀释液 54μL,枸橼酸钠抗凝血浆样本 54μL,设置空白对照。
酶结合物工作液 96μL 加入全部孔位,封板密封,37℃孵育 63min。
倒掉孔内液体,洗涤液浸泡 26s,拍干,连续洗板 5 次。
避光滴加显色 A、B 液各 50μL,轻震板体,显色 13min。
终止液 50μL 加入每孔,终止反应并混匀微孔板液体。
擦拭板底后酶标仪 450nm 读取 OD 吸光度。
标准曲线换算凝血因子 Ⅱ 含量,评估外源性凝血通路起始因子。
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