本试剂盒采用间接法ELISA检测原理，微孔板固相表面预先包被纯化的人蛋白酶3抗原，加入待测样本后，样本中的PR3抗体可与固相抗原特异性结合，孵育洗涤去除未结合杂质，加入酶标记的抗人IgG二抗，使其与结合在固相上的PR3抗体结合，再次洗涤后加入显色底物启动酶促显色反应，显色强度与样本中PR3抗体含量呈正相关，通过吸光度检测实现抗体定量分析。
基本参数：
产品名称：人蛋白酶3抗体(PR3Ab)ELISA试剂盒
英文名称：PR3Ab Elisa Kit
货号：Y-E484
规格：48T/96T
灵敏度：≤1AU/mL
检测范围：2AU/mL - 128AU/mL
反应时间：总时长 132min（样本 72min，二抗 40min，显色 20min）
显色系统：间接法 TMB 显色
检测波长：450nm
特异性：特异性结合人血清抗 PR3 自身抗体，不结合 PR3 抗原蛋白
重复性：板内 CV＜6.3%，板间 CV＜7.9%
注意事项：血清样本不可高脂溶血，类风湿因子干扰需前置预处理
储存与有效期：
未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下：
试剂室温回温 30min，稀释洗涤液，配制 PR3Ab 阳性标准品梯度，标记酶标板对照孔与样本孔。
标准孔、待测样本孔、空白孔加对应液体，每孔加入酶标记二抗工作液，封板封口。
37℃避光孵育 66min，抗原抗体一步结合反应。
弃液后洗涤液浸泡每孔 33s，洗板 5 次，拍干残留洗液。
加入显色底物，震荡混匀，37℃避光显色 18min。
加入终止液终止显色，混匀板面液体。
450nm 读取 OD 值，对照标准曲线判定样本 PR3Ab 含量。
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