本试剂盒采用经典双抗体夹心酶联免疫吸附原理,在酶标板微孔中包被人甘露糖受体特异性抗体,待测样本、标准品中的MR抗原可与固相抗体特异性结合,叠加酶标记二抗形成免疫夹心复合物,洗涤除杂后进行底物显色,吸光度值随样本中甘露糖受体含量升高而增大,通过标准曲线换算可完成定量检测。
产品参数:
产品名称 | 人甘露糖受体(MR)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E2617 |
英文名称 | MR ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:检出限 2.8pg/mL
检测范围:9pg/mL~288pg/mL
反应时间:37℃孵育 60min,酶标记二抗 55min,显色 17min
显色系统:HRP-TMB 显色,硫酸终止
检测波长:450nm,参比 620nm
特异性:特异性识别巨噬细胞甘露糖受体,不结合 MBLR 蛋白
重复性:批内 CV<8.1%,批间 CV<10.4%
注意事项:不可使用反复冻融超过 3 次的生物样本;洗板不可用力冲击孔底
通用注意事项:
样本要求
血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸;组织匀浆充分离心去除沉淀;样本分装冻存,反复冻融≥3 次会导致抗原降解,检测值偏低。
温度控制
孵育温度严格 37℃,温箱温度波动、室温过低会降低结合效率,背景升高、重复性变差。
避光操作
TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化,显色全程避光,试剂避光存放。
洗板规范
洗涤不充分会造成高背景、假阳性;拍干时使用干净吸水纸,禁止交叉污染微孔。
污染防控
实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶;枪头一次性更换,标准品与样本避免交叉加样;底物液变色、出现沉淀不可使用。
安全防护
终止液含稀硫酸,具有腐蚀性,避免接触皮肤、黏膜;实验废液集中收集中和后处理,不可直接倾倒。
失效判定
试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异,均判定失效,禁止继续实验。
稀释校正
样本 OD 值高于最高标准孔时,必须稀释重测,最终结果乘以稀释倍数;低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。
空白对照
空白孔吸光度应极低,若空白孔 OD>0.1,说明洗涤不充分或试剂污染,实验作废重做。
储存禁忌
试剂盒不可冷冻结冰,冷冻会造成酶标抗体蛋白变性,直接导致试剂盒完全失效。
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实验操作流程:
试剂盒室温回温 35min,稀释系列标准品,微孔板分孔标记,每孔加入待测样本或标准品 49μL,空白孔无试剂添加。
各孔加入酶联反应工作液 101μL,封板膜密封微孔板,上下轻晃混匀反应体系。
37℃避光孵育 61min,单层平放酶标板进行孵育。
撕除封膜弃液,洗板液浸泡微孔 31s,洗板 5 次,倒扣板条拍干余液。
加入显色 A 液、B 液各 50μL,避光 37℃显色 15min。
滴加终止液 50μL 终止酶促反应,轻微振荡混匀。
酶标仪 450nm 测定吸光度,标准曲线法定量甘露糖受体水平。
关键字: 人甘露糖受体;MR;ELISA试剂盒;
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