人细胞角蛋白17(CK17)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附原理，酶标板预先包被人CK17特异性抗体，样本中的细胞角蛋白17与固相抗体特异性结合，孵育反应后洗除游离杂物质，加入辣根过氧化物酶标记二抗形成免疫复合物，充分洗板后加入底物显色，显色强度与CK17含量成正比，通过标准曲线拟合精准测定样本中靶蛋白浓度。
基本参数‌：

产品名称：人细胞角蛋白17(CK17)ELISA试剂盒

英文名称：CK-17   Elisa Kit
货号：Y-E220

规格：48T/96T

灵敏度：最低检出 0.06ng/mL

检测范围：0.1～9.1ng/mL

反应时间：37℃静置孵育 75min，酶结合物 45min，避光显色 14min

保存条件：所有组分 2～8℃避光，底物液不可长时间光照

显色系统：即用型 TMB 单组分显色液

检测波长：仅 450nm 测定吸光度

标准曲线绘制：线性回归结合非线性拟合双模式可选

注意事项：石蜡组织提取蛋白需充分脱蜡，残留蜡质会抑制抗原结合
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

试剂盒室温回温 27min，CK17 包被酶标板去除保护液，洗涤缓冲液洗板 2 遍，拍干微孔水分。

排布孔位：空白对照孔、梯度标准品孔、肿瘤组织上清样本孔；标准品孔加入 CK17 标准品 55μL，样本孔加入稀释上清液 55μL，空白孔补稀释液。

每孔加入 HRP 标记二抗 55μL，封板膜密封，37℃孵育 67min。

倒掉孔内液体，洗板液浸泡每孔 40s 弃除，洗板 5 次，倒置充分拍干微孔。

依次添加显色 A、B 液各 50μL，遮光室温显色 13min。

滴加终止液 50μL 混匀终止酶促反应。

酶标仪 450nm 测吸光度，定量检测 CK17 含量。
公司正在出售的产品：