本试剂盒运用经典双夹心ELISA检测原理,酶标板微孔固定抗人CK-18特异性抗体,待测样本中的细胞角蛋白18可与固相抗体高效特异性结合,洗涤去除非特异性杂质后,加入酶标记二抗形成三元免疫复合物,再次洗板后启动底物显色,显色深浅与CK-18含量正相关,实现样本靶蛋白的定量检测。
基本参数:

产品名称:人细胞角蛋白18(CK-18)ELISA试剂盒
英文名称:CK-18 Elisa Kit
货号:Y-E278
规格:48T/96T
灵敏度:检出限 0.04ng/mL
检测范围:0.07~7.9ng/mL
反应时间:样本孵育 87min,二抗 55min,显色 20min
保存条件:试剂盒 2~8℃冷藏,终止液常温密封存放
显色系统:双组份 TMB 显色,硫酸终止反应
检测波长:450nm+600nm 双波长读数
标准曲线绘制:空白孔校正基线后四参数拟合
注意事项:凋亡细胞上清中 CK18 片段富集,样本不可反复冻融裂解细胞
关键注意事项:

本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
实验步骤如下:

试剂盒室温平衡 32min,CK18 捕获抗体包被板弃保存液,洗涤液洗板 1 次后拍干微孔。
区分空白孔、系列标准品孔、血清待测样本孔;标准品孔加入梯度 CK18 标准品 60μL,样本孔加入预处理稀释血清 60μL,空白孔添加稀释缓冲液。
每孔加入酶结合抗体 60μL,封板封闭,37℃湿盒孵育 74min。
掀开封板倾倒废液,洗涤液浸泡每孔 35s 弃液,连续洗板 6 次,用力拍干微孔。
每孔加入显色混合底物 100μL,避光 37℃显色 15min。
每孔加注终止液 50μL,轻摇板体终止底物显色。
450nm 读取 OD 数值,对照曲线计算 CK18 浓度。
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