本试剂盒依托双抗体夹心ELISA原理，固相酶标板包被人CK-20特异性抗体，可特异性捕获待测样本中的细胞角蛋白20抗原，孵育结合后洗除体系杂质，加入辣根过氧化物酶标记配对二抗形成免疫复合物，充分反应洗板后加入底物显色，终止显色后检测吸光度，结合标准曲线精准测定样本中CK-20的表达含量。
基本参数：
产品名称：人细胞角蛋白20(CK-20)ELISA试剂盒
英文名称：CK-20 Elisa Kit
货号：Y-E276
规格：48T/96T
灵敏度：检出下限 0.085ng/mL
检测范围：0.16～11.3ng/mL
反应时间：37℃孵育 85min，酶标二抗 58min，避光显色 21min
保存条件：整套试剂 2～8℃，浓缩洗涤液可室温储存 60 天
显色系统：A 液基质 + B 液氧化剂双组分分步混合显色
检测波长：450nm+630nm 双波长扣除孔间差异
标准曲线绘制：7 梯度标品拟合，采用加权四参数法绘制曲线
注意事项：避免移液器枪头交叉使用，防止孔间样本交叉污染
关键注意事项：
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）
避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果
显色过程需避光，避免阳光直射影响结果
实验步骤如下：
试剂盒全部试剂室温平衡 35min，CK-20 特异性包被板弃保护液，洗涤缓冲液洗板 2 次，倒扣拍干微孔。
划分孔位：空白对照孔、系列梯度标准孔、腹水稀释待测样本孔；标准品孔加入梯度 CK-20 标准品 50μL，样本孔加入稀释腹水样本 50μL，空白孔补稀释液。
每孔加入 HRP 标记检测抗体 50μL，封板密封，37℃孵育 69min。
倾倒孔内废液，洗涤液加满每孔静置 40s 丢弃，洗板 6 次，倒置拍干微孔残留洗液。
依次添加显色 A 液、B 液各 50μL，遮光室温显色 19min。
滴加终止液 50μL，轻摇酶标板终止显色。
酶标仪 450nm 读取 OD 值，对照标准曲线计算 CK-20 蛋白浓度。
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