本试剂盒基于双抗体夹心ELISA技术原理,固相酶标板包被人CK-19特异性单克隆抗体,加入标准品和待测样本后,样本内细胞角蛋白19与固相抗体特异性结合,洗板去除游离组分,加入HRP标记二抗形成免疫复合物,洗除未结合抗体后显色,依据吸光度和标准曲线精准定量CK-19含量。
基本参数:

产品名称:人细胞角蛋白19(CK-19)ELISA试剂盒
英文名称:CK-19 Elisa Kit
货号:Y-E277
规格:48T/96T
灵敏度:≤0.05ng/mL
检测范围:0.08~8.5ng/mL
反应时间:封闭 30min,样本孵育 91min,二抗 51min,避光显色 18min
保存条件:板条单独分装密封 2~8℃,其余试剂同温保存
显色系统:经典 HRP-TMB 显色体系
检测波长:450nm 为主波长,650nm 参比
标准曲线绘制:5 个标准浓度点,外推法计算超高浓度样本
注意事项:胸腔积液、腹水样本需离心取上清,细胞碎片会干扰检测
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

试剂盒室温放置 30min,CK19 抗体包被微孔板弃孔内液体,洗涤缓冲液洗板 2 次,倒扣拍干微孔残留液体。
设立空白对照孔、倍比标准品孔、胸腔积液稀释样本孔;标准品孔加入 CK19 标准品 50μL,样本孔加入稀释积液样本 50μL,空白孔补稀释液。
每孔加入 HRP 标记检测抗体 50μL,覆膜封板,37℃恒温孵育 61min。
弃废液,洗涤液注满每孔静置 30s 倒掉,洗板 5 次,吸水纸彻底拍干微孔。
分别加入显色 A 液、B 液各 50μL,遮光室温显色 17min。
滴加终止液 50μL,轻微震荡终止显色反应。
450nm 酶标仪读数,定量 CK19 含量。
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