Anti-pan-AKT抗体靶标:pan‑AKT,识别 AKT1、AKT2、AKT3 总蛋白,不针对磷酸化位点;基因别名 PKB,UniProt:P31749、P31751、Q9Y243;蛋白分子量约 56‑60 kDa。
仅用于科学研究,不可用于临床诊断。
免疫原
采用人源 AKT 蛋白全长或保守区段重组蛋白作为免疫原,针对三种 AKT 亚型共有保守序列制备,实现 pan 识别。
反应种属
人、小鼠、大鼠,部分批次可识别猴等哺乳动物样本。
推荐应用及起始工作稀释比
| 实验类型 | 建议起始稀释 |
| --- | --- |
| Western Blot(WB) | 1:1000‑1:5000 |
| 免疫组化石蜡切片 IHC‑P | 1:200‑1:800 |
| 免疫荧光 / 细胞免疫染色 IF‑ICC | 1:200‑1:1000 |
| 免疫沉淀 IP | 1:50‑1:200 |
| ELISA | 1:500‑1:2000 |
最优工作浓度需要根据样本、实验条件自行梯度优化。
抗体亚型
- 兔多克隆:IgG
- 兔重组单克隆:IgG
- 小鼠单克隆:IgG1/IgG2a(视克隆而定)
储存条件
1. 原液‑20 ℃分装保存,严禁反复冻融。
2. 短期(1‑2 周)可 4 ℃保存。
3. 含叠氮钠制剂:不可用于活细胞实验、HRP 直接偶联体系。
实验要点
1. WB 样本:建议 RIPA 裂解液提取蛋白,添加蛋白酶抑制剂;该抗体检测总 AKT,如需检测活化状态,需要搭配磷酸化 AKT(p‑AKT Ser473 / Thr308)抗体平行实验。
2. IHC‑P:抗原修复优先选用柠檬酸盐缓冲液 pH 6.0,高温高压 / 水浴热修复。
3. IP 实验:优先选用无叠氮钠版本抗体。
4. 特异性说明:pan‑AKT 识别 AKT1/2/3 全部总蛋白,不识别其他 Akt 家族外同源激酶;样本存在亚型表达差异时条带信号强弱会随之变化。
预期实验结果
1. WB:在 56‑60 kDa 位置出现特异性条带;AKT 各亚型分子量接近,通常为单一条带。
2. 组织 / 细胞染色:AKT 主要定位于细胞质,激活条件下可观察到细胞核内信号。
注意事项
1. 本产品仅限体外科研使用,不能用于人体临床检测、诊断。
2. 避免强光照射,试剂用完及时密封。
3. 不同组织、细胞系 AKT 本底表达水平存在差异,建议设置阳性对照与阴性对照。
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关键字: Anti-pan-AKT抗体;
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