背景[1-3]
茜素红S染色液(1%)常与固绿或Mayer苏木素染色液合用,形成橘红色沉淀,适用于少量钙盐组织的染色。钙在人体内大量存在，构成骨骼作为支持人体的支架，在分泌、运送、肌肉收缩、神经传导等也起重要作用。许多染料可以于钙形成螯合物，包括茜素红S、红紫素、核固红等。茜素红S属一种蒽醌类衍生物，是茜素磺酸钠盐，它能与碳酸钙或磷酸钙中的钙盐螯合形成橙红色复合物。茜素红S是橙黄色的针状体。溶于水，微溶于醇，不溶于氯仿和苯。1%水溶液pH2.15。由茜素经发烟硫酸磺化，然后转变为钠盐制得。属一种蒽醌(Anthraquinone)类的衍生物，是茜素磺酸钠盐，它能与钙盐以鳌和方式形成复合物，用以识别组织细胞的钙盐成分。钙盐变化是骨细胞增殖分化和骨组织成骨潜能的标志之一。
通过茜红素染色，产生橘红色沉积。茜素红S(Alizarin Red S)钙染色法是一种旨在通过鳌和技术，使钙离子和茜素红S产生复合物，来分析固定处理的细胞样本中橘红色钙沉积现象的权威而经典的技术方法。主要适用于动物原生代或培养细胞的钙沉积和钙化结节检测。广泛用于骨细胞或组织病理生理的研究。配制方法：将托盘天平上称取0.1g茜素磺酸钠定溶于100ml蒸馏水中转移入滴瓶中。或用茜素红粉加PBS溶解后，要注意调节PH值到7.2。0.1%的茜素红Tris-HCL(PH8.3),用0．Imol／L的HCI或0 1％的NaOH调节。
应用[4][5]
用于茜素红S对中华倒刺鲃幼鱼的染色效果以及对其氧化应激响应研究
中华倒刺鲃(Spinibarbus sinensis)隶属于鲤形目(Cypriniformes)、鲤科(Cyprinidae)、鲃亚科(Barbinae)、倒刺鲃属(Spinibarbus),探求一种适合标记放流鱼类的方法是对其进行跟踪监测以及评估人工增殖放流效果的重要前提,目前应用于仔稚鱼标记效果最理想的是化学荧光物质标记,在国内相关研究中,大多数仅关注其浓度的选择,浸泡时间一般都规定在24 h,并且仅关注染色效果与浓度的关系,很少关注荧光物质浸泡对标记鱼类是否造成损伤及损伤程度,荧光物质对不同发育阶段的标记鱼类毒性大小等问题。不同浓度茜素红S胁迫下,除脑组织GSH-Px随着茜素红S浓度的提升不断升高外,肝脏、鳃和脑组织抗氧化酶活性均表现为低浓度被诱导而高浓度受抑制的规律,与茜素红S浓度呈抛物线型剂量效应关系。
研究表明:不同组织抗氧化酶系统对茜素红S的胁迫具有组织特异性,ARS浓度过高会对幼鱼不同组织会造成氧化损伤。鳃组织对茜素红S的胁迫敏感性最高,因此在荧光浸泡标记过程中,选择适宜茜素红S浓度染色时,应考虑鳃组织的敏感度,并保持水体氧气充足。
参考文献
[1]Sublethal effects of alizarin complexone marking on Baltic cod(Gadus morhua)eggs and larvae[J].Aquaculture.2011
[2]Validation of first annulus formation in red snapper otoliths with the use of an alizarin complexone fluorescent marker[J].Andrew J.Fischer,Edward J.Chesney,James H.Cowan.Environmental Biology of Fishes.2010(3)
[3]Stock enhancement program for black sea bream(Acanthopagrus schlegelii)in Hiroshima Bay:Monitoring the genetic effects[J].Enrique Blanco Gonzalez,Kazuya Nagasawa,Tetsuya Umino.Aquaculture.2008(1)
[4]A New Era for Restocking,Stock Enhancement and Sea Ranching of Coastal Fisheries Resources[J].Johann D.Bell,Kenneth M.Leber,H.Lee Blankenship,Neil R.Loneragan,Reiji Masuda.Reviews in Fisheries Science.2008(1-3)
[5]霍来江.茜素红S对中华倒刺鲃幼鱼的染色效果以及对其氧化应激响应[D].华中农业大学,2015.