背景技术
N-Fmoc-N'-三苯甲基-D-谷氨酰胺是固相接肽中常用的试剂，我们可以通过较简单的方法以D-谷氨酰胺为初始原料来合成(ref:Tetrahedron lett;EN;32;6;1991;739-742)，即2-D-Gln-OH经三步反应得到产物，但由于产率比较低且D-Gln原料市场价格昂贵，而D-Glu价格则相对便宜很多，下是我们从这个角度出发介绍了N-Fmoc-N'-三苯甲基-D-谷氨酰胺合成方法。
制备方法[1]
1、D-谷氨酸与Z-Cl(苄氧羰基氯)反应得到Z-D-Glu-OH(N-苄氧羰基-D-谷氨酸)，Z-D-Glu-OH在有机溶剂N,N-二甲基甲酰胺中，在三乙胺，溴苄的存在下，选择性的保护α-羧基，得到Z-D-Glu-OBzl(N-苄氧羰基-D-谷氨酸苄酯)。
2、Z-D-Glu-OBzl在有机溶剂中，加入三乙胺、氯甲酸乙酯、氨水(摩尔比:1:1:2~6),在-20~20℃反应6~24小时后得到2-D-Gln-OBzl(N-苄氧羰基-D-谷氨酰胺苄酯)。有机溶剂为四氢呋喃或乙酸乙酯;
3、Z-D-Gln-OBzl的醋酸溶液在浓硫酸催化下与三苯甲醇反应，在45~60℃反应8~24小时得到Z-D-Gln(Trt)-OBzl(N-苄氧羰基-N-三苯甲基-D-谷氨酰胺苄酯)；
4、Z-D-Gln(Trt)-OBzl氢化脱去Z基团和Bzl基团，得到D-Gln(Trt)-OH(N-三苯甲基-D-谷氨酰胺)。脱去Z-、Bzl-保护用10%钯碳、5%钯碳中的一种和氢气、环己烯中的一种;
5、D-Gln(Trt)-OH(N-三苯甲基-D-谷氨酰胺)上Fmoc保护基得到N-Fmoc-N'-三苯甲基-D-谷氨酰胺。
应用
专利CN202180071425.X介绍了新型的靶向CXCR4的化合物的制备，其中，环[Phe‑Tyr‑Lys(iPr)‑D‑Arg‑2Nal‑D‑Gln‑D‑Glu]‑Lys(iPr)(18)的合成，在90℃，用20％v/v哌啶在DMF中的溶液对Fmoc‑Rink Amide MBHA树脂(CEM，0.56mmol/g)脱保护1min，两次，并用3mL DMF清洗5次。然后将Fmoc‑Lys(iPr，Boc)‑OH缀合至Rink Amide MBHA树脂。在90℃，用20％v/v哌啶在DMF中的溶液移除Fmoc基团1min。在每次脱保护后，用3mL DMF清洗树脂三次。按照类似程序，将Fmoc‑D‑Glu(OAll)‑OH、N-Fmoc-N'-三苯甲基-D-谷氨酰胺(偶联两次)、Fmoc‑2‑Nal‑OH(偶联两次)、Fmoc‑D‑Arg(Pbf)‑OH(偶联两次)、Fmoc‑Lys(iPr，Boc)‑OH、Fmoc‑Tyr(tBu)‑OH和Fmoc‑Phe‑OH(偶联两次)依次偶联至肽基树脂。使用Pd(PPh3)4(20mg)/苯基硅烷(300μL)脱除D‑Glu，上的‑O烯丙基保护基(2×6min，35℃)。然后，除去Phe上的Nα‑Fmoc，并使用DIC/HOBt在DMF中进行环化(3×10min，在90℃)。环化后，对肽脱保护，并同时通过在35℃，用92.5/5/2.5TFA/TIS/H2O的混合溶液处理3h从树脂切下肽。过滤后，真空除去TFA并通过添加冷二乙醚沉淀肽。通过制备HPLC纯化粗肽[2]。
参考文献
[1]吉尔生化(上海)有限公司. 一种 N－芴甲氧羰基－N－三苯甲基－D－谷氨酰胺的合成法:CN200710036268.0[P]. 2008-07-16.
[2]省卫生服务机构,英属哥伦比亚大学. 新型的靶向CXCR4的化合物:CN202180071425.X[P]. 2023-07-18.