富马酸福莫特罗(formoterol fumarate)是日本山之内公司研制开发的第三代陆肾上腺素受体激动剂类平喘勿,于1988年3月在日本上市。该药主要用于缓解由支气管哮喘、急慢性支气管炎、喘息性支气管炎、肺气肿等疾病引起的呼吸困难等症状,尤其适用于夜间哮喘急性发作，它是一种高效、高选择性、长效且有显著抗炎作用的受体激动剂。福莫特罗杂质B是其生产和制备过程中的主要有关物质，其中文名为N‑[2‑羟基‑5‑[(1RS)‑1‑羟基‑2‑[[2‑(4‑甲氧基苯基)乙基]氨基]乙基]苯基]甲酰胺。
检测与分析[1]
HPLC色谱条件:色谱柱,C8 4.6mm×250mm(AGT公司),5um;流速,1.0mL/min;检测波长,214nm;流动相,A液为乙腈,B液为磷酸缓冲液(3.73g NaH2PO4+0.35g H3PO4溶解到1000mL水中,pH3.1)，按梯度洗脱。
LC-MS条件:色谱柱,C8 4.6mm×250mm(AGT公司),5um;流速,1.0mL/min;检测波长,214 nm;流动相,A液为乙腈,B液为30mmol/L乙酸铵(用醋酸调pH3.1),梯度洗脱程序同HPLC色谱条件。电喷雾电离源,正离子检测,电离电压,3.0kV;电喷雾接口干燥气(N2)流速,280L/h;离子源温度，250℃;锥孔电压,30V;脱溶剂气温度,115℃。
HPLC法测定富马酸福莫特罗中的有关物质:采用欧洲药典(EP5)液相色谱条件,在214nm波长处分析测定富马酸福莫特罗样品,结果表明,含量>0.1%的有关物质只有一个,其相对保留时间为0.7，与欧洲药典EP5记载的福莫特罗杂质B相一致，按归一化法计算其含量为0.4%，并确定福莫特罗杂质B为研究对象。
LC-MS法测定富马酸福莫特罗中的有关物质：采用相同的色谱柱,用紫外和正离子同时检测，在214nm波长下,用醋酸铵-醋酸缓冲液代替EP5液相色谱条件中的磷酸盐缓冲液,其pH和其他条件均不变，分析测试富马酸福莫特罗样品,结果表明，LC-M$色谱条件测得的色谱图与HPLC的图谱基本一致,含量>0.1%的有关物质只有1个，其保留时间7.53min，相对保留时间为0.7。该色谱峰的质谱图出现的2个主要正离子峰的质荷比分别为331、313,根据主峰的质谱特征，富马酸福莫特罗分子结构(M=344)中容易脱去一分子水,形成脱去一分子水的碎片离子质荷比326(M-18=344-18),推断质荷比为331的离子为该杂质的M+H峰,而质荷比为313的物质为该杂质的脱水碎片(M-18=331-18),由此判断该杂质的分子量为330,与富马酸福莫特罗的分子量相差14,为富马酸福莫特罗去甲基降解物，该杂质恰好与EP5收载的富马酸福莫特罗杂质B相吻合，因此推断该色谱峰为富马酸福莫特罗去甲基降解物即福莫特罗杂质B。
参考文献
[1]和云龙,祝仕清,王娅莉,等. LC-MS分析富马酸福莫特罗中有关物质[J]. 河北医科大学学报,2009,30(6):585-588. DOI:10.3969/j.issn.1007-3205.2009.06.016.