背景技术
西他列汀磷酸盐是由默克公司开发的一种治疗II型糖尿病的药物，商品名为捷诺 维(Januvia)，于2006年经美国FDA批准后上市，在全球多个国家被批准使用。该药主要通过抑制二肽基肽酶-4(DPP-4)的活性，保护内源性肠降血糖素和增强其作用而控制血糖水平。经临床研究表明，该药物是一个口服有效、单用或与二甲双胍、吡格列酮合用都有明显的降血糖作用，具有口服安全，耐受性好，不良反应少等优点。由于受到专利对该产品的限制，多家医药公司从合成该药的重要手性氨基中间体着手研究，其中(R)-3-氨基-4-(2,4,5-三氟苯基)丁酸就是合成西他列汀磷酸盐的一个重要的手性中间体。
中国专利CN10728616A公开一种利用来源节杆菌的转氨酶，对3-羰基-4-(2,4,5- 三氟苯基)-丁酸羟基酯类底物进行转化，获得对应的(R)-3-氨基-4-(2 ,4 ,5-三氟苯基)-丁酸羟基酯，再经过LiOH强碱水解，获得(R)-3-氨基-4-(2,4,5-三氟苯基)丁酸中间体。当前报道的西他列汀磷酸盐中间体酶法合成中，仍以手性氨基酯类产物为主，后续要经过强碱的处理，再水解为β-氨基酸终产物；另外，反应体系以DMSO为助溶剂的转化效率不高，且反应过程也受到底物的抑制，这些现实问题都影响中间体(R)-3-氨基-4-(2,4,5-三氟苯基)丁酸的生产效率和成本。
制备方法[1]
用乙二醇分别溶解3-羰基-4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酸甲酯、3-羰基-4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酸乙酯、3-羰基-4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酸异丙酯和3-羰基-4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酸叔丁酯底物为0.24g、0.26g、0.27g和0.29g，配制成100mM的底物浓度。每个反应体系都控制在10mL，依次向反应釜中加入1mL 1M的pH9.0三乙醇胺缓冲液，1mL 10mM的磷酸吡哆醛，1mL 3M的异丙胺和0.5g转氨酶酶细胞，1mL乙二醇助溶剂，保持反应体系中乙二醇的比例为20％。反应在50℃下运行，利用3M的异丙胺控制反应过程的pH维持在9.0。底物以匀速滴加的方式控制在2h内加入反应体系。反应24h后，分别取样离心，用液相分析不同条件下的转化率和产物(R)-3-氨基-4-(2,4,5-三氟苯基)丁酸的手性纯度，结果见下表。
参考文献
[1]尚科生物医药(上海)有限公司. 一种制备(R)-3-氨基-4-(2,4,5-三氟苯基)-丁酸的方法:CN202010594899.X[P]. 2021-12-28.